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实验三 观察植物细胞的有丝分裂 1、观察植物细胞的有丝分裂过程 2、学习根尖分生组织的压片技术 洋葱或蚕豆根尖、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、醋酸洋红或改良碱性品红、酒精灯。 一、植物细胞的有丝分裂过程二、植物根尖分生组织压片法 一、植物细胞的有丝分裂过程 取洋葱或蚕豆根尖压片（或已制好的洋葱根尖纵切片）置显微镜下观察。仔细找出分裂的细胞或正在分裂中各期细胞。正在分裂的细胞内部发生了十分复杂的变化。在显微镜下可以观察到显著的变化是细胞核。所以，平时着重观察细胞核变化中的几个阶段。 间期[即未进行细胞分裂的时期，又叫静止期] 在切片上这个时期的细胞数目最多，细胞核无变化，具纯一构造核内染色质分布均匀、核膜、核仁均存在。 前期[染色体形成时期] 细胞由不分裂状态逐渐转变为分裂状态，最显著的是细胞核内的染色质。由分散状态形成许多小颗粒[染色质粒]，进而连成细丝状，最后成一条条的棒状带状物，即染色体，前期之未，每一个染色体纵裂为二，但并不立即分开，仍然互相靠拢，同时核膜，核仁逐渐消失。 前期 中期[纺锤体形成时期] 染色体在细胞内发生移动，原来散乱的各个染色体最后排列在细胞中央的一个平面上，这个平面叫赤道面。这些在赤道面上的染色体合成赤道板。同时，在这个时期，一些无色的细丝从细胞的两极伸到赤道板的附近，与纵裂两半的染色单位联系着。这些无色细丝叫做纺锤丝。全部纺锤丝合成纺锤体。（纺锤丝在普通显微镜下，往往不易见到，要缩小光圈，转动细准焦螺旋，有时亦可见到。） 后期[染色体分离时期] 纵裂后的两个染色单体开始向细胞的两极移动，由于纺锤丝收缩而产生的牵引力，两组染色单位从赤道板趋赴纺锤体的两极。从染色体开始移动的两组染色单体到达细胞的两极，这个阶段是细胞分裂的后期。 中期 后期 末期[子核成立时期] 到达细胞两极的染色单体逐渐改变形态。染色体解螺旋、变细、伸长，逐渐形成染色质，最后成纯一的构造。周围产生核膜，中间出现核仁，这时纺锤体消失。在原来赤道面的地方产生新的细胞壁，将细胞分裂成两个部分。这时，一个母细胞就分裂成为两个子细胞了。 绘几个正在进行分裂的细胞，分别表示细胞分裂的各个时期。 末期 二、植物根尖分生组织压片法 1、取材 切取根长1－2厘米的黑麦或洋葱根尖1厘米进行前处理。 [一般在上午10－11时取材] 2、前处理 将切下的根尖放在0.4－0.2%的秋水仙碱溶液处理2－5小时，然后用水冲几次，或将材料放入蒸馏水中，在0－3℃的条件下处理24小时。 3、固定 在醋酸酒精液固定3－24小时，然后用95%酒精洗净其醋酸，移入70%酒精中，在阴凉处保存。 4、解离 将根从固定液中取出，用流水冲洗10分钟，放入1当量盐酸（1NHCl）中，于60℃下水解10分钟，或置盐酸酒精（INHCI与95%酒精各半）取出水洗2、3次，再放入2%果胶酶水溶液中，在室温下处理半小时，取出,水洗1－2次。 5、染色和压片 取解离后的根尖于载玻片上，滴加几滴改良碱性品红或醋酸洋红染液。放置约10分钟，待根尖染成暗红色，加盖玻片，用吸水纸放在盖玻片上面，用右手拇指在吸水纸上对准根尖轻压，或用解部针柄端轻轻敲击，将根尖材料压成一均匀薄层，注意不要移动盖玻片。 6、镜检 将所做玻片置显微镜下观察，可看到有丝分裂过程中不同分裂时期的染色体，为了观察染色体形态结构和进行计数，应找到分裂中期的细胞，若染色嫌浅，可从盖玻片一侧加洒液，同时在另一侧用滤纸片吸引染料，又可将载玻片在酒精灯上微微加热，染色体着色效果更好些。 1、如何制作植物细胞有丝分裂的装片标本？ 2、简述植物细胞有丝分裂的主要过程？ 3、绘植物细胞有丝分裂过程图。 * *