乙型肝炎病毒微生物学及检验.pptxVIP

第二节 乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒(HBV) 以肝脏炎性病变为主的传染性疾病 是乙型肝炎的病原体乙型肝炎全球分布乙肝现状乙肝病毒携带者占人口10%.全世界20亿曾感染过、有3.5亿乙肝携带者、我国乙肝携带者总数高达1.3亿.10%转化为各种慢性肝病，包括有慢性肝炎、肝硬化和肝癌我国慢性肝病人数3000万，肝病死亡人数每年30万全球HBV感染流行情况20亿人曾感染HBV, 占全球人口1/315%~25%最终将死于与HBV有关肝病慢性HBV感染者约3.5~4亿，其中亚洲占2/3,中国占1/3每年全球死亡75~100万例，占死因第7位全球60亿人口Lavanchy D.J Viral Hepatitis.2004;11:97-107 一 生物学特性形态与基因结构 嗜肝DNA病毒科 正肝DNA病毒属电镜：3种形态 大球形颗粒 小球形颗粒 管型颗粒完整的HBV颗粒为大球形颗粒，又称 Dane颗粒，直径42nm，分为包膜与核心两部分，包膜HBsAg，核心部分含有环状双股DNA、DNA聚合酶、HBcAg和HBeAg等，是病毒复制的主体1 大球形颗粒（Dane）：直径42 nm外衣壳：相当于一般病毒包膜双层外壳内衣壳：相当于一般病毒核衣壳Dane颗粒核 心 DNA DNA聚合酶病毒衣壳成分：蛋白质由壳粒组成。壳粒是衣壳的形态学亚单位，多肽分子是衣壳的化学亚单位功能保护病毒核酸参与感染过程具有抗原性2小球形颗粒 是HBV感染肝细胞时过剩的病毒衣壳组成 直径22nm 成分 HBsAg少量Pre S2+HBsAg 不含 DNA及DNA聚合酶 无法复制3 管形颗粒 成分与小球形颗粒相同，是由多个小球形颗粒串联而成 直径22nm长100—500nm 无法复制 三种形态之间的关系 基因组基因组长约 3.2kb， 为部分双链环状 DNApre-S1 pre-S1蛋白pre-S2 pre-S2蛋白S HBsAgpre-C HBeAgC HBcAgP DNAPX HBxAg转录逆转录 DNA RNA DNA HBV的复制 HBV的复制方式很特殊,在复制过程中有逆转录过程,与逆转录病毒相似,逆转录后的DNA可整合至靶细胞的染色体3、HBV的抗原组成 表面抗原 HBsAg外衣壳抗原 前S1抗原 前S2抗原内衣壳抗原 核心抗原 HBcAg e抗原 HBeAg大球形颗粒形态（完整的病毒，具有传染性）HBsAg（外膜蛋白）HBcAg（核衣壳蛋白）HBV DNADNAP聚合酶》机体感染HBV后产生相应的免疫反应，形成多种不同的抗原抗体系统表面抗原抗体系统 (HBsAg，抗HBs)核心抗原抗体系统 (HBcAg，抗HBc)e 抗原抗体系统(HBeAg，抗HBe) （1）表面抗原曾用名“澳抗”出现时间：HBV感染后2—6个月由S基因码产生的蛋白4个亚型adr adw ayw ayr 抗-HBs●出现时间：急性感染后期或HBsAg 消失后（空白期 或 窗口期）●抗-HBs为保护性抗体（中和抗体）其出现标志着HBV感染进入恢复期●抗-HBs 对相同 HBsAg亚型的HBV再感染有免 疫力，但对不同亚型的HBV保护力不完全。 （2）核心抗原是Dane颗粒中核心组成部分被HBsAg覆盖，血中不易检出抗HBc-IgM：是HBV近期感染或慢性感染者病毒活动的标志抗HBc-IgG：凡“有过” HBV感染者均可阳性HBcAg的免疫原性最强抗HBc-IgG可终身阳性 （3）e抗原为可溶性蛋白血清HBeAg阳性者中，HBV DNA阳性率为92%左右，是HBV复制和传染的感染性标志其抗体有利于抑制病毒复制，抗-HBe的出现标志着病毒复制减少、传染性降低乙 肝（3）HBeAgHBeAg是HBcAg的降解产物HBV C基因前C区C 区表 达前C / C 蛋白切割、加工HBcAgHBeAgHBeAg只存在于血清中分泌到细胞外 4 培养特性黑猩猩 最敏感 疫苗效价 安全评价不能在细胞培养中分离培养 5 抵抗力抵抗力强70%乙醇无法灭活HBV传染性与抗原性不一致 二 微生物学检验标本处理： 1. 常规检测：24小时分离 5天内2—8℃ 5天后—20℃/—70℃ 2.核酸检测：血清（常用） 血浆 肝素抗凝X 6小时处理24小时按成 保存 —70℃ 直接病毒诊断光镜-----包涵体