微生物学微生物的生长及其控制.pptxVIP

第六章微生物的生长及其控制第一节 微生物生长的测定第二节 微生物的生长规律第三节 影响微生物生长的主要因素第四节 微生物培养法概论第五节 微生物生长的控制第一节 微生物生长的测定 一、微生物的纯培养 二、微生物生长的测定 （一）微生物细胞数目的测定 （二）微生物生长量的测定 （三）丝状微生物菌丝长度的测定一、微生物的纯培养微生物在自然界中不仅分布很广，而且都是混杂地生活在一起。要想研究或利用某一微生物，必须把混杂的微生物类群分离开来，以得到只含一种微生物的培养。微生物学中将在实验室条件下从一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代称为纯培养。纯培养的分离，是研究和利用微生物的第一步，是微生物工作中最重要的环节之一。最常用的方法有稀释平板法、划线法、单细胞挑取法及利用选择培养基分离法等。纯培养的分离方法 稀释倒平板法 划线法 单细胞挑取法 选择培养基分离法 稀释倒平板法（倾注法（混菌法）、涂布法）这是最常用的纯种分离法，先将待分离的材料作一系列的稀释(如1：10、1：100、1：1000、1：10，000……)，然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至45℃的琼脂培养基相混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当，平皿上就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。划线法单细胞挑取法利用选择培养基分离法不同微生物需要不同的营养物质。有些微生物生长适于酸性环境，有些则适于碱性环境。各种微生物对不同的化学试剂如消毒剂(酚)、染料(结晶紫等)、抗生素及其他物质等具有不同的抵抗能力。利用这些特性，便可配制成适合于某种微生物生长而限制其他微生物生长的各种选择性培养基，以达到纯种分离的目的。另外，也可以将待分离的样品先进行适当处理，以消除不希望分离到的微生物。对一些生理类型比较特殊的微生物，为了提高分离机率，往往在涂布分离前先进行富集培养，其目的是提供一个特别设计的培养环境，以帮助所需的特殊生理类型的微生物的生长，而不利于其他类型微生物的生长。高氏培养基土豆培养基牛肉膏培养基选择培养基分离法1 ml1.dilute sample9 ml10 100 1000 104 105 106107微生物纯培养分离方法的比较稀释平板法 既可定性，又可定量，用途广泛平板划线法 方法简便，多用于分离细菌单细胞挑取法 局限于高度专业化的科学研究利用选择培养基法 适用于分离某些生理类型 较特殊的微生物二、微生物生长的测定微生物特别是单细胞微生物，体积很小，个体的生长很难测定，而且也没有什么实际应用价值。因此，在微生物学的研究和应用中，通常是测定群体的增加量，即群体的生长。测定不同种类、不同生长状态微生物的生长情况，需要选用不同的指标。通常对单细胞微生物来说，既可测定细胞数目，又可测定生长量；而对多细胞微生物(尤其是丝状真菌)，则常以菌丝生长的长度等作为生长指标。 （一）微生物细胞数目的测定 －－适用于单细胞微生物或丝状微生物的孢子直接计数法－－总菌计数 1、计数板计数法（常用） 2、比例计数法间接计数法－－活菌计数 1、平板菌落计数法 2、液体稀释法 3、厌氧菌菌落计数其他计数法 1、比浊法 2、膜过滤法血球计数板 各种型号的全自动血球计数仪活菌计数的一般步骤 （二）微生物生长量的测定 －－适用于一切微生物直接法 1、测体积法 2、称重法间接法 1、含氮量测定法 2、DNA含量测定法 3、其他生理指标法（三）丝状微生物菌丝长度的测定培养基表面菌体生长速率测定法培养料中菌体速率测定法单个菌丝顶端生长速率测定法 第二节 微生物的生长规律一、微生物的个体生长和同步生长二、单细胞微生物的典型生长曲线三、微生物的连续培养四、微生物的高密度培养一、微生物的个体生长和同步生长微生物在适宜的环境条件下，不断地吸收营养物质，并按照自己的代谢方式进行代谢活动，如果同化作用大于异化作用，则细胞质的量不断增加，体积得以加大，于是表现为生长。简单地说，生长就是有机体的细胞组分与结构在量方面的增加。同步培养技术：是指设法使某一群体中的所有个体细胞尽可能都处于同样细胞生长和分裂周期的一种培养方式。通过分析此群体在各阶段的生物化学特性变化，来间接了解单个细胞的相应变化规律。同步生长：通过同步培养的手段而使细胞群体中各个体处于分裂步调一致的生长状态的一种生长方式。获得微生物同步生长的方法离心分离法过滤分离法膜洗脱法选择法诱导法控制温度控制培养基成分抑制DNA合成法同步生长的细胞经过2~3个分裂周期后会丧失同步性。选择法又称机械筛选法，是通过物理学方法从随机、不同步群体中选择出同步的群体。此法可在不影响微生物代谢的情况下获得同步培养物。若微生物在相同发