专题112基本操作程序.pptxVIP

目的基因的检测与鉴定;一、目的基因的获取;(1) 从基因文库中获取目的基因;基因文库的构建过程;;部分基因文库的构建过程;;如何从基因文库中找到所需要的基因？;为什么要构建基因文库呢？;(2) 利用PCR技术扩增目的基因;PCR的过程：;过程：;模板 原料 引物 　酶 控制温度;(3) 用化学方法直接人工合成;二、基因表达载体的构建—核心;二、基因表达载体的构建—核心;启动子的作用：;3．方法：同种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接。;三、将目的基因导入受体细胞;方法;（1）农杆菌转化法 ①农杆菌特点：;③过程：;③花粉管通道法 （我国独创）;２.目的基因导入动物细胞;3.目的基因导入微生物细胞;个体生物学水平鉴定—;DNA分子杂交示意图 ;归纳步骤;1.检测;2）检测目的基因是否转录出了mRNA;归纳: 基因工程的基本操作程序;寻根问底—— （1）为什么要构建基因文库？直接从含有目的基因的生物体内提取不行吗？;寻根问底：将目的基因直接导入受体细胞不是更简便吗？如果这么做，结果会怎样？;思考：1.作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？;（2） 目的基因是否导入受体生物中需要有筛选标记； （3） 为了增强目的基因的表达水平，往往还要增加一些其他调控元件，如增强子等； （4） 有时需要确定目的基因表达的产物存在于细胞的什么部位，