土壤中分解尿素的细菌的分离和计数.pptxVIP

课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80点此播放教学视频/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80 课题背景1、尿素的利用:尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。2、细菌利用尿素的原因:CO（NH2）2+H2O CO2+2NH3脲酶/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80点此播放教学视频/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80 3、课题目的①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌一.研究思路㈠.筛选菌株㈡.统计菌落数目㈢.设置对照/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80点此播放教学视频/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80 （一）筛选菌株启示?水生耐热细菌Taq耐高温的Taq DNA聚合酶选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80点此播放教学视频/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80 KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4`7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g思考：①从物理性质看此培养基属于哪类？固体培养基/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80点此播放教学视频/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80 ②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？碳源：葡萄糖、尿素氮源：尿素3、培养基选择分解尿素的微生物的原理？培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80点此播放教学视频/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80 ㈡.统计菌落数目：1.间接计数法（活菌计数法）⑴原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)，M代表稀释倍数。2、显微镜直接计数：/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80点此播放教学视频/video/serchBox.aspx?q=%E7%94%9F%E7%89%A9%E9%80%89%E4%BF%AE%E4%B8%80 思考书本22页问题：说明设置重复组的重要性。第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复组，因此结果不具有说服力。第二位同学考虑到设置重复组的问题，涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另2个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。这个实例启示学生，在设计实验时，一定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致，结果不一致，意味着操作有误，需要重新实验。注意事项①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。③统计