基因工程技术和应用.pptxVIP

基因工程院校：辽宁大学商学院专业：09级旅游管理（2）班学号：290607225姓名：何国莉基因工程概况/image/e49cf911e79a8884a7ef3f9d?基因工程是/view/136.htm生物工程的一个重要分支，它和/view/35980.htm细胞工程、/view/280795.htm酶工程、/view/48656.htm蛋白质工程和/view/354549.htm微生物工程共同组成了/view/4579.htm生物工程。 所谓/view/8563.htm基因工程（genetic engineering)是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，属于/view/242197.htm基因重组。是将/view/3852088.htm外源基因通过体外重组后导入受体/view/3687.htm细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、/view/9107.htm翻译表达的操作。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的/view/232169.htm遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的/view/212514.htm工具酶进行切割后，把它与作为/view/184171.htm载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中，以让外源物质在其中“安家落户”，进行正常的复制和表达，从而获得/view/1106576.htm新物种的一种崭新技术。基因工程狭义的基因工程：指用体外重组DNA技术去获得新的重组基因广义的基因工程：指按人们意愿设计，通过改造基因或基因组而改变生物的遗传特性。如用重组DNA技术，将外源基因转入大肠杆菌中表达，使大肠杆菌能够生产人所需要的产品基因工程的主要技术环节第一步：获取目的基因第二步：目的基因与运载体结合第三步：将目的基因导入受体细胞第四步：目的基因的检测和表达第一步：获取目的基因目的基因 ：/image/91ae68c6de9830599d163d9f?如植物的抗病（抗病毒 抗细菌）基因；种子的贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因干扰素基因等，都是目的基因。 如转基因荧光蝌蚪获取基因途径 　要从浩瀚的“基因海洋”中获得特定的目的基因，是十分不易的。科学家们经过不懈地探索，想出了许多办法，其中主要有两条途径：第一：从供体细胞的DNA中直接分离基因　直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。鸟枪法的具体做法是：用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞提供的DNA（即外源DNA）的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制（在/view/8907.htm遗传学中叫做扩增），从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来。用鸟枪法获得目的基因的优点是操作简便，缺点是工作量大，具有一定的盲目性。又由于真核细胞的基因含有不表达的DNA片段，一般使用人工合成的方法。第二：人工合成基因 　目前人工合成基因的方法主要有两条。一条途径是以目的基因转录成的/view/207320.htm信使/view/207320.htmRNA为模版，/view/540413.htm反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需要的基因。 另一条途径是根据已知的蛋白质的/view/15155.htm氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照/view/1284721.htm碱基互补配对的原则，推测出它的基因的/view/3851939.htm核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。如人的/view/519.htm血红蛋白基因胰岛素基因等就可以通过人工合成基因的方法获得 基因样本第二步：目的基因与运载将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就会因碱基互补配对而结合，形成一个重组DNA分子。如人的胰岛素基因就是通过这种方法与大肠杆菌中的质粒DNA分子结合，形成重组DNA分子（也叫重组质粒）的。 DNA重组过程示意图第三步：将目的基因导入受体细胞目的基因的片段与运载体在生物体外连接形成重组DNA分子后，下一步是将重组DNA分子引入受体细胞中进行扩增。 基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌，枯草杆菌，土壤农杆菌，酵母菌和动植物细胞等。 用人工方法使外重组的DNA分子转移到受体细胞，主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。例如，如果运载体是质粒，受体细胞是细菌，一般是将细菌用氯化钙处理，以增大