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复制亲代DNA子代DNA复制(replication)是指遗传物质的传代,以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。DNA复制的特征复制的方式 ——半保留复制半不连续复制有特定的起始位点双向复制一、DNA的复制(一)DNA复制的特征1.半保留复制 DNA生物合成时,母链DNA解开为两股单链,各自作为模板(template)按碱基配对规律,合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA,一股单链从亲代完整地接受过来,另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。含重氮-DNA的细菌培养于普通培养液继续培养于普通培养液密度梯度实验 梯度离心结果 第一代 第二代 ——实验结果支持半保留复制的设想。AGGTACTGTCCATGACAGGTACTGCCACTGGTCCATGACGGTGACCAGGTACTGTCCATGACAGGTACTGCCACTGGTCCATGACGGTGACCAGGTACTGCCACTGGTCCATGACGGTGACC+CCACTGGGGTGACC母链DNA 复制过程中形成的复制叉子代DNA 半保留复制的意义按半保留复制方式,子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致,即子代保留了亲代的全部遗传信息,体现了遗传的保守性。遗传的保守性,是物种稳定性的分子基础,保守性是相对的,不是绝对的。2.固定的起始位点3.双向复制原核生物复制时,DNA从起始点(origin)向两个方向解链,形成两个延伸方向相反的复制叉,称为双向复制。 oriA B CterA. 环状双链DNA及复制起始点B. 复制中的两个复制叉C. 复制接近终止点(termination, ter)真核生物每个染色体有多个起始点,是多复制子的复制。习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子(replicon) 。复制子是独立完成复制的功能单位。 oriorioriori5’3’3’5’5’3’5’3’5’3’5’3’复制子3?3′5′3′3′5′5?解链方向3?5?4. 半不连续复制领头链(前导链)随从链(滞后链)顺着解链方向生成的子链,复制是连续进行的,这股链称为领头链。另一股链因为复制的方向与解链方向相反,不能顺着解链方向连续延长,这股不连续复制的链称为随从链。复制中的不连续片段称为岡崎片段(okazaki fragment)。 领头链连续复制而随从链不连续复制,就是复制的半不连续性。 (二) DNA复制的物质 模板(template) : 解开成单链的DNA母链底物(substrate): dATP, dGTP, dCTP, dTTP引物(primer): 提供3?-OH末端使dNTP可以依次聚合 聚合酶(polymerase): 依赖DNA的DNA聚合酶。其他的酶和蛋白质因子1.模板、底物和引物 (dNMP)n + dNTP → (dNMP)n+1 + PPi 聚合反应的特点DNA 新链生成需引物和模板; 新链的延长只可沿5? → 3?方向进行 。2.酶和蛋白因子 (1) DNA聚合酶全称:依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase,DDDP)简称:DNA-pol活性:1. 5??3? 的聚合活性 2. 核酸外切酶活性 原核生物的DNA聚合酶DNA-pol ⅠDNA-pol ⅡDNA-pol ⅢDNA-pol Ⅰ(109kD)功能:对复制中的错误进行校读,对复制和修复中出现的空隙进行填补。5′ A G C T T C A G G A T A? 3′ | | | | | | | | | | |3′ T C G A A G T C C T A G C G A C 5′ 核酸外切酶活性? 催化5? ? 3?的复制延长。(20个核苷酸左右) 3? ? 5?外切酶活性能辨认错配的碱基对,并将其水解。 5? ? 3?外切酶活性能切除突变的 DNA片段。DNA-pol Ⅱ(120kD) DNA-pol II基因发生突变,细菌依然能存活。 它参与DNA损伤的应急状态修复。 DNA-pol Ⅲ(250kD)功能是原核生物复制延长中真正起催化作用的酶。 真核生物的DNA聚合酶DNA-pol ?起始引发,有引物酶活性。DNA-pol ?参与低保真度的复制 。DNA-pol ?在线粒体DNA复制中起催化作用。DNA-pol ?延长子链的主要酶,有解螺旋酶活性。DNA-pol ?在复制过程中起校读、修复和填补缺口的作用。DNA聚合酶共同点1.以
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