植物胚胎培养.pptxVIP

第4章 植物胚胎培养 胚胎培养：是指使胚或具胚器官在离体无菌条件下发育成幼苗的技术。 根据在培养中所取的外植体的部位不同，植物胚胎培养包括胚培养、胚乳培养、胚珠培养、子房培养。 胚珠和子房培养由于取材的时期不同，又包括：受精以后的胚珠子房培养、未受精胚珠和子房培养珠柄珠被成熟胚珠珠心胚囊合点珠孔胚珠的结构和胚囊的形成胚胎培养的意义A.克服远缘杂交的不育性，获稀有杂种植物?植物远缘杂交时，经常出现花粉在异种植物上不萌发，或虽萌发但不能正常生长，或虽生长但不能伸入子房等不亲和现象，或胚乳发育不良导致杂种幼胚败育等。杂交不孕现象是远缘杂交的一个难点。杂交不亲和可通过试管受精技术解决；幼胚败育 可通过胚培养技术解决。B. 打破种子休眠，缩短育种年限。 主要有以下两种：（1）使种胚发育不全的植物获得后代。例如天麻、 兰花种子成熟时，胚只有6-7个细胞，利用离 体培养可以打破休眠提早萌发。 （2）使含抑制性物质不发芽的种胚发芽。苹果属离 体胚培养48h即可萌发，而用种子则要9个月C、使生活力低下或无生活力的种子萌发 许多落叶果树，特别是杂交种产生早熟、生活力低下甚至无活力的种子，利用胚胎培养可使种子萌发，提高萌发率。例如桃、芭蕉、山芋等。D、使柑橘类植物合子胚正常发育 这类植物种子内存在大量的珠心胚，珠心胚生活力很强，往往得不到合子胚后代，影响杂交育种结果，利用胚培养可以尽早取出合子胚进行培养，从而获得杂种后代。E、获三倍体或单倍体植株 因被子植物胚乳细胞大多为三倍体，胚乳培养可以获得三倍体植株，从而使植物胚胎培养成为一种新的育种途径，用于果树、瓜类等经济作物产生无子果实。另外，对远缘杂种的胚进行培养时，可以通过染色体消失法获得单倍体。F、用于基础研究 研究胚胎发育过程、胚胎发生的条件以及影响因素，胚乳生长发育及形态建成过程。一、培养类型1、幼胚培养2、成熟胚培养胚培养 胚培养：采用人工的方法将胚从种子、子房或胚珠中分离出来，再放在无菌的条件下，让其进一步生长发育，以至形成幼苗的过程。胚的类型合子胚：由受精卵形成的胚体细胞胚：在离体或活体条件下由除合子之外的孢子体细胞形成的胚非合子胚孤雌胚：由未受精卵形成的胚孤雄胚：由小孢子或花粉粒形成的胚不定胚：由植物组织或器官直接产生的体细胞胚。（一）胚龄与胚性发育的关系 一般胚龄越大，对培养条件越宽松，离体培养的成功率就越高，相反胚龄越小成功率越低。1、培养已分化的成熟胚，只需要提供简单的营养元素，即在含无机盐和糖的培养基上，即可萌发生长。2、培养未分化完全的幼胚，一般要求完全异养的条件。培养基中除要有无机盐和糖外，还要提供维生素、氨基酸等有机成分以及植物激素等。（1）成熟胚的特征?成熟胚一般具有完整的胚结构。 胚芽、胚根、胚轴等都已得到分化，子叶也大致形成。?成熟胚不需要脱分化可直接成苗。 成熟胚只要提供适宜的生长条件，打破休眠，胚体即可直接萌发形成健壮的幼苗。 培养过程要避免脱分化，为此，在培养中应避免损伤胚，培养基中也应避免使用易诱导产生愈伤组织的植物激素，如2,4-D。?对培养条件要求宽松。2、成熟胚培养过程---以玉米成熟胚培养为例1）玉米种子消毒2）在黑暗条件下，将种子放在含无菌湿润滤纸的培养皿中培育6h。3）将吸涨的种子在无菌培养皿内将胚分离出来4）无菌水冲洗3次5）在MS培养基中暗培养。6）观察：2d出现胚根，3-4 d出现胚芽，10d长成幼苗。玉米成熟胚的培养（1）成熟胚培养? 植物胚胎发育经过： 原胚期 球形胚期 心形胚期 鱼雷胚期 子叶期 成熟期成熟胚一般指子叶期以后至发育完全的胚(胚芽、胚轴、胚根、子叶)。植物胚胎发生过程： 原胚－球形胚－心型胚－鱼雷胚－子叶胚球形胚前期心型胚前期球形胚鱼雷胚成熟胚培养较易成功，在含有无机元素和糖的培养基上，就能正常生长成幼苗。由于种子外部有较厚的种皮包裹，不易造成损伤，易于进行消毒，因此，将成熟或未成熟种子用70%酒精进行几秒种的表面消毒，再用无菌水冲洗3-4次，然后在无菌条件下进行解剖，取出胚并接种在适当的培养基上培养。 （2）幼胚培养? 幼胚是指子叶期以前的幼小胚，由于幼胚培养在远缘杂交育种上有极大的利用价值，因此，其研究和应用越来越深入和广泛。Laibach在1925～1929年间，通过培养亚麻种间杂种幼胚，成功地获得了种间杂种，首次证实了这种方法在实际应用中的价值。李继侗，1933年在银杏培养中发现了胚乳提取物能够促进银杏离体胚的生长。这一发现为后人使用植物胚乳汁液、幼嫩种子及果实提取液等天然物质促进培养物生长具有启示作用。随着组织培养技术的不断完善，幼胚培养技术也在进步，现在可使心形期胚或更早期的长度仅0.1-0.2mm的胚生长发育成植株。现在幼胚培养成功的有大麦、甘蔗、甜菜、胡萝卜等。二 、