第4章 DNA的复制突变损伤和修复.pptVIP

嘧啶二聚体TT的核苷酸切除修复 切除修复作用是一种常见普遍的功能，能识别DNA双螺旋结构的改变，对遭到破坏而呈现不正常结构的部分加以去除。失去这种修复功能的细菌突变株，即表现出容易被电离辐射和紫外线所杀死。 着色性干皮病(xeroderma pigmentosa)是一种遗传病，病患者对日光或紫外线特别敏感，往往容易出现皮肤癌。分析表明，患者皮肤细胞中缺乏核苷酸切除修复有关的酶，因此对紫外线引起的DNA损伤不能修复。这说明切除修复系统的障碍可能是癌症发生的一个原因。 修复系统缺陷的遗传疾病——Xeroderma pigmentosa（着色性干皮病） 三、错配修复 这是一种对DNA复制中出现的碱基错误配对进行修复的方式。 细胞错配修复系统如何能够区分复制过程中的“旧”链和“新”链的呢？ DNA复制完成后，GATC序列中腺嘌呤N6位将由Dam甲基化酶进行甲基化。但复制后DNA新链并不立即甲基化，而是要过几分钟才进行甲基化。在这几分钟内错配修复系统进行错配修复。 大肠杆菌参与错配修复的蛋白质至少有12种，功能是区分两条链或进行修复。 MutS二聚体识别并结合到DNA的错配碱基部位， MutL二聚体与MutS结合组成复合物沿DNA双链向两方向移动，直至遇到GATC序列为止。 DNA形成突环。 随后Mut H核酸内切酶结合到MutSL上，并在未甲基化链GATC位点的5’端切开。 在此切除链的过程中，解螺旋酶Ⅱ和SSB帮助链的解开。切除的链可长达1000个核苷酸以上，直到将错配碱基切除。新的DNA链由DNA聚合酶Ⅲ和DNA连接酶合成。 真核生物的DNA错配修复与原核生物大致相同。人类的hMSH2和hMLHl基因编码的蛋白质能够识别错配碱基和GATC序列，与大肠杆菌对应的MutS和MutL一样，其余过程也都有对应的成分来完成。 复制过程中的错配率在10-5左右，这种错误的99%随即被聚合酶的校对功能所改正。余下的被错配修复系统修复，最后使得DNA复制的错配率为10-10。 四、重组修复 当DNA发动复制时尚未修复的损伤部位也可以先复制再修复，由于此过程包含了基因重组的过程，故称为重组修复，又因为修复发生在复制之后，故也称为复制后修复(post-replication repair)。 如含有嘧啶二聚体、烷基化引起的交联和其他结构损伤的DNA仍然可以进行复制，但是复制酶在损伤部位无法通过碱基配对合成子代DNA链，它就跳过损伤部位，重新开始复制DNA，但子代链在损伤相对应处会留下一个缺口。 这种遗传信息有缺损的子代DNA分子可通过遗传重组而加以弥补，即从同源DNA的母链上将相应核苷酸序列片段移至于链缺口处，然后用再合成的序列来补上母链的空缺。 重组修复 在重组修复过程中，DNA链的损伤部位可能被切除，也可能未被切除。当进行第二轮复制时，如果损伤还留在母链上，仍会给复制带来困难，复制经过损伤部位时所产生的缺口还需通过同样的重组过程来弥补，直至损伤被切除修复所消除。 但随着复制的不断进行，若干代后，即使损伤始终未从亲代链中除去，而在后代细胞群中也已被稀释，实际上消除了损伤的影响。 参与重组修复的酶包括与重组有关的主要酶类以及修复合成的酶类。RecA蛋白具有交换DNA链的活力。RecA蛋白被在DNA重组和重组修复中均起关键作用。 基因recBCD编码多功能酶RecBCD，具有解螺旋酶、核酸酶和ATP酶活性，使DNA在重组位点产生3’单链，该酶亦为重组和重组修复所必需。修复合成需要DNA聚合酶和连接酶。 重组修复机制缺陷，有可能导致癌症。目前发现，妇女的Brca1和Brca2两个基因如果有缺陷，80％的概率可能会发生乳腺癌。实验表明，这两个基因编码的蛋白质BRCAI和BRCA2可以与重组蛋白Rad51相作用，很可能是参与重组修复过程。 五、易错修复 许多能造成DNA损伤或抑制复制的处理均能诱导细胞产生一系列复杂的反应，称应急反应(SOS response)。 SOS反应包括诱导细胞进行DNA的损伤修复、诱变效应、细胞分裂的抑制以及溶原性细菌释放噬菌体等多种反应。 SOS反应是细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下，为求得生存而出现的应急效应，SOS反应诱导的修复系统包括精确修复(error-free repair)和易产生差错的修复(error-prone repair)两类。 前面提及的错配修复、直接修复、切除修复和重组修复均能识别DNA的损伤或错配碱基而加以消除，在它们的修复过程中并不引入错配碱基，因此属于精确修复。SOS反应能诱导切除修复和重组修复中某些关键酶和蛋白质的产生，使这些酶和蛋白质在细胞内的含量升高，从而加强切除修复和重组修复的能力。 但同时SOS反应还能诱导产生缺乏校对功能的DNA聚合酶，它能在DNA损伤