第7章 基因的表达调控.pptVIP

目前RNA干扰技术已应用于多种哺乳动物病毒的研究，包括对人类艾滋病病毒、乙型肝炎病毒、流感病毒、丙型肝炎病毒、SARS冠状病毒和口蹄疫病毒等的研究。 RNA干扰不仅是研究基因功能的一种强大工具，而且可能会用于直接从源头上沉默致病基因，从而可治疗癌症和病毒感染等疾病。国外用RNA干扰技术成功地沉默了小鼠体内的导致高胆固醇血症的基因。RNA干扰的治疗技术也正在进入人体试验阶段。 在许多动物、植物等真核生物细胞中，存在由微小RNA (miRNA)诱导的对mRNA剪切或翻译抑制的现象，这与RNA干扰的分子机制极为相似。 第二种小RNA分子------miRNA 不同的是，miRNA是长度为19-25核苷酸的单链RNA (ssRNA) ，是由细胞内DNA转录后经Drosha酶和Dicer酶加工而成的，也可引起目的基因的沉默，因此miRNA是与siRNA不同的另一类基因表达调节因子。 细胞内的miRNA是以DNA为模板，由RNA聚合酶Ⅱ 转录产生的，有自己的启动子，绝大多数的miRNA基因位于基因组的基因间区，或位于已知基因的内含子区域。 首先，在细胞核中，miRNA基因转录产生的初始转录物被剪切形成miRNA前体。 miRNA的产生 初始转录物是单链RNA，长达几千或上万碱基，含有发夹结构。发夹结构经核内的Drosha酶剪切产生长度60-80nt的miRNA前体。 随后，miRNA前体被运输到细胞质中，由Dicer酶对它进一步加工，形成成熟的miRNA。 单链的miRNA诱发基因沉默反应的过程与双链RNA诱发的RNA干扰基本相似。 miRNA对目的基因表达的调控方式主要有两种，即mRNA剪切和mRNA的翻译抑制。 miRNA参与细胞正常发育过程中的基因表达调控 与siRNA不同的是，miRNA是由正常基因组序列编码转录产生的，它们在细胞内的数量众多，参与细胞的发育分化过程，是在转录后水平和翻译水平调节基因表达的重要调节分子。 最早发现的miRNA是在线虫体内发现的，它们在线虫发育的不同时间和组织中表达，具有时间和空间特异性，积极参与线虫的发育过程。 由于这种RNA长度很短且寿命也短，所以一开始被称为small temporal RNA或stRNA。 目前在各种动植物中已经发现几百种miRNA，广泛参与细胞和组织器官的分化等发育过程，他们是细胞中的正常成员，在调控发育、造血细胞分化、细胞繁殖、细胞凋亡、组织发育等过程中发挥重要的作用。 (2)miRNA与靶mRNA的3‘UTR区不完全互补配对，二者结合使翻译无法进行。这种情况下是抑制mRNA的翻译而不对靶基因进行降解。 (1)miRNA与靶mRNA完全互补，导致靶mRNA被切割。 (3)有的miRNA同时具有上述两种功能。 miRNA可能的作用机制 miRNA获得Science评选的2002年世界十大科技突破的第1名，获得广泛关注。 siRNA与miRNA比较 siRNA miRNA 形态 双链，大小22-23bp 单链，大小19-25nt 来源 细胞中出现dsRNA时才产生，由长的dsRNA切割形成 细胞内正常成员，由DNA转录加工生成 作用机制 与dsRNA序列同源的mRNA都会被降解或被抑制翻译，还可能进入细胞核对DNA进行修饰沉默基因的转录。 与miRNA完全同源的mRNA会被降解；不完全同源的会被结合而被抑制作为模板翻译 只要细胞内出现dsRNA都会引起siRNA出现，引发RNA干扰 每种miRNA只能作用于特定的mRNA目标，有专一性 Cell 2013.4.25 真核细胞的基因表达调控是非常复杂的，我们的了解只是刚开始，不了解的内容比已经知道的要多得多。 结束语 细胞之间的通讯 生物、社会与通讯 社会是个体按一定规则构成的群体，社会现象在生物界中相当普遍地存在，并不为人类所特有。生物学家对于动物的社会性早有研究，蚂蚁和蜜蜂的社会性最有代表性。后来，人们对狼群生活的深入观察表明狼也有族群，有头狼，这与猿猴族群类似。 生命科学的研究证明，人类机体的细胞社会是高度发达、相当完善的社会，可以列举出细胞社会与人类社会的诸多类似之处，如巨噬细胞类似于人类社会的警察，它们存在于机体的每种组织中，起天然免疫监视作用。巨噬细胞来源于骨髓的髓系前体细胞，在脾和胚胎肝脏中产生。 近来将单核细胞称为“没有经验的”巨噬细胞(相当于刚从警校毕业的警员)，它们从骨髓独特的环境中(警校)进入血液(一般社会)时，血流中有各种因素会影响它们的功能和表型性质，这样的影响因素包括细胞因子、趋化因子、激素、免疫球蛋白、脂肪酸、肾上腺能拮抗剂和胆碱能拮抗剂，在各种归巢因素的影响下，单核细胞选择进入不同的组织(定岗)并定居于其中。 组织的微环境影响巨噬细胞的功能，所以不同组织中的巨噬细胞有不同的功能表型和命运。当组