原核基因表达调控2011.pptxVIP

基因表达是指贮存在DNA序列中的遗传信息经过一系列步骤表现出其生物学功能的过程永久型和调节型表达基因表达=基因转录+翻译基因表达调控（regulation of gene expression）：对基因表达过程各层次的调节 转录水平（transcriptional level）转录后水平（post-transcriptional level ）翻译水平（translation level）翻译后水平（post-translation level）主要是转录水平的调控1.DNA序列2.调控蛋白3.DNA-蛋白质相互作用RNA聚合酶活性基因表达的调控方式: 阻遏负调控:调控蛋白+DNA序列 基因的表达 (相应蛋白质降低) 促进正调控:调控蛋白+DNA序列 基因的表达 (相应蛋白质增加)第一节 原核生物基因表达的调控一、乳糖操纵子(lactose operon)操纵子（operon）：原核生物中几个功能相关的结构基因成簇串联排列组成的一个基因表达的协同单位（DNA序列）.一个操纵子 =编码序列（2-6） +启动序列+操纵序列+(其他调节序列)乳糖操纵子的发现：细菌以葡萄糖为能量来源葡萄糖充分时： 与葡萄糖代谢有关的酶基因---表达 与其他糖代谢有关的酶基因---关闭葡萄糖耗尽时，乳糖存在（培养基）： 与乳糖代谢有关的酶基因 ---表达 与葡萄糖代谢有关的酶基因---关闭细菌对乳糖的利用及其相关的酶: 乳糖 (在透过酶作用下进入细菌） β半乳糖苷酶 （细菌中少量存在） 异构乳糖 β半乳糖苷酶 （细菌中少量存在） 葡萄糖+半乳糖 β半乳糖苷酶 （细菌中少量存在）转乙酰基酶（一）乳糖操纵子（lactose opron） 结构调控基因 控制位点 结构基因DNAIPOZYa阻遏蛋白启动序列操纵序列β半乳糖苷酶β半乳糖苷透过酶乙酰基转移酶RNA聚合酶结合位点（二）Lac阻遏物的作用---负调控Lac阻遏物结构特点调控机制 （负调控）由基因I编码生成的蛋白质具有四级结构的蛋白质具有4个相同亚基每个亚基中都有一与诱导剂结合的位点Lac阻遏物与O基因结合： 结构基因关闭Lac阻遏物与诱导剂结合： 不与O基因结合，结构基因开放 RNA聚合酶结合，转录开始Lac操纵子诱导剂生理性诱导剂实验常用诱导剂别位乳糖异丙基硫代半乳糖（IPTG）乳糖操纵子的负调控IOO诱导剂ρ图15-4可诱导调节一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下，由原来关闭的状态转变为工作状态，即在某些物质的诱导下使基因活化（三）CAP-cAMP复合物在乳糖操纵子表达中 的作用----乳糖操纵子的正调控低葡萄糖、高乳糖、高cAMP时： Lac 阻遏蛋白不封闭转录, CAP+ cAMP 加强转录。只有乳糖存在时：只能利用乳糖解除阻遏蛋白的作用CAP-cAMP复合物的激活作用 CAP+cAMP 乳糖操纵子 导致结构基因转录(正调控)cAMP 在原核生物中的作用 （饥饿信号）CAP(分解物基因激活物蛋白):有二个相同亚基的蛋白质一个与DNA结合的domain 一个与cAMP结合的domain 葡萄糖存在时：优先利用葡萄糖作为能源。与阻遏蛋白的存在有关 --乳糖操纵子的负调控与cAMP有关： 葡萄糖 cAMP Lac操纵子（-）乳糖操纵子（lactose opron） 结构调控基因 控制位点 结构基因DNAIPOZYa阻遏蛋白启动序列操纵序列β半乳糖苷酶通透酶乙酰基转移酶cAMP-CAP结合位点RNA聚合酶结合位点 CAP- cAMP复合物 在乳糖操纵子表达中的作用---正调控 Lac 阻遏蛋白封闭转录时, CAP对该系统不发挥作用条件1:低葡萄糖高cAMP高乳糖Lac 阻遏蛋白不封闭转录, CAP+ cAMP 加强转录。条件2:OO低乳糖条件4:高葡萄糖低cAMP高乳糖条件3:OOOLac 阻遏蛋白不封闭转录时,没有CAP存在,也无高效转录活性。低乳糖图15-5原核生物基因表达的一般情况 （乳糖操纵子）环境条件的变化是相关基因表达的外界信号基因表达 的负调控基因表达 的正调控正、负调控协同表达葡萄糖、乳糖浓度的变化Lac阻遏物与操纵基因cAMP+CAP与相应的DNA序列二、色氨酸操纵子1.阻遏物对色氨酸操纵子的负调控 调控基因 结构基因 催化分支酸转变为色氨酸 的酶trptrpR阻遏物对色氨酸操纵子的负调控　 阻遏物+ Trp结合操纵基因 相同二个 共阻遏物 亚基组成 的蛋白质高Trp时：阻遏物+Trp结合操纵基因低Trp时：阻遏物 不结合操纵基因2.衰减作用对色氨酸操纵子的调控衰减子 （attenuator）---DNA位于L基因中,离E基因5’端约30-60bp。通过衰减子（转录终止结构）使转录终止。高Trp 时：衰减子起作用，终止转录。 产生“衰减子