12基因工程的基本操作步骤.pptVIP

* 目的基因的获取 1 基因表达载体的构建 2 3 将目的基因导入 受体细胞 4 目的基因的检测 与鉴定 一、目的基因的获取 1 目的基因主要是编码蛋白质的基因： 如：与生物抗性相关的基因、与优良品质相 关的基因、与生物药物和保健品相关的基因、 与毒物降解相关的基因、与工业用酶相关的 基因、具调控作用的因子等。 2 获取目的基因的常用方法： 1、从基因文库中获取 2、利用PCR技术扩增 3、人工合成 未知序列 已知序列 ②反转录法 目的基因的信使RNA 目的基因 ③化学合成法 蛋白质的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 基因的核苷酸序列 目的基因 合成 推测 推测 单链DNA 合成 （三） 人工合成法 ①在基因较小，核苷酸序列已知的情况下，可以利用DNA合成仪人工合成 （一） 从基因文库中获取目的基因 1. 基因文库的概念: 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的 群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。 2. 基因文库的种类: 基因组文库：含有一种生物的全部基因 部分基因文库：只包含了一种生物的部分基因， 如：cDNA文库 3. 基因文库的目的： 为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得所需的目的基因 基因文库的构建方法 ① 基因组文库的构建 提取某种生物的全部DNA 用适当的限制酶酶切 一定大小