生物学分子生物学dna复制.pptxVIP

教学要求;主要内容;问 题;DNA replication;一、半保留机制;一、半保留机制;;2、实验证据（1958 Meselson 和Stahl）;单林娜 制作;DNA半保留复制的生物学意义： DNA的半保留复制表明DNA在代谢上的稳定性，保证亲代的遗传信息稳定地传递给后代。;; 原核生物（Prokaryote）：单复制起点，即——整个染色体只有一个复制单位 ;单林娜 制作;真核生物（Eukaryote） : 多复制起点，即－－一个genome中有多个复制单位;2、复制方向（复制过程的顺序性）;;;Electron Microscopy of replicating DNA reveals replicating bubbles.; 单向复制 ;;Bidirectional (双向复制) replication of a circular bacterial replicon;;E.coli [t-] ;;leading strand（前导链）： DNA复制时，一股以3’ 5’方向的母链作为模板，指导新合成的链以5’ 3’方向连续合成的链称为前导链。 （复制方向与解链方向一致）;lagging strand（后随链): DNA复制时，一股以5’ 3’方向的母链作为模板，指导新合成的链沿5’ 3’合成1000—2000(100-200)个核苷酸不连续的小片段的链称为随从链。 （复制方向与解链方向相反);岗崎片段（Okazaki）： DNA复制时，一股以5’ 3’方向的母链作为模板，指导新合成的链沿5’ 3’合成1000—2000(100-200)个核苷酸不连续的小片段称之为岗崎片段。 岗崎片段由DNA连接酶连成一条完整的新链。;? ? 半不连续复制： 在DNA复制过程中，亲代DNA分子中以3’ 5’方向的母链作为模板指导新的链以5’ 3’ 方向连续合成，另一股以5’ 3’ 为方向的母链则指导新合成的链以 5’ 3’方向合成许多不连续的片段（岗崎片段） 这种复制方式称之为半不连续复制。 ;单林娜 制作;DNA replication;;DNA复制反应的共同特点;DNA replication;一、 DNA复制所需的蛋白质和酶;2. DNA复制所需的蛋白质和酶;DNA helicase (DNA解旋酶);大肠杆菌中解旋酶的种类;single-stranded binding protein (SSB, 单链结合蛋白);DNA primase (DNA 引发酶);DNA topoisomerase (拓扑异构酶); ;Primosome (引发体);性质 ;DNA polymerase III;DNA polymerase III holoenzyme;DNApol Ⅲ 各亚基的功能;单林娜 制作; 3’ 5’ 5’ 3’ exonuclease polymerase; ; ;二、 DNA复制的过程;(1) Initiation (起始);The structure of E.Coli origin oriC;单林娜 制作;单林娜 制作;单林娜 制作;4. 引发体的组装;;;Re-initiation of bacterial replication at new origins before completion of the first round of replication ;(3) Elongation (延伸);;Leading strand elongation;回环模型：后随链模板绕聚合酶形成180。的回环，穿过DNA聚合酶III的裂缝，使两条模板链在此处呈相同的3′→5′方向。随着后随链模板在聚合酶中穿行，聚合酶便从引物3′端合成冈崎片段。;阶段一;阶段三;Elongation: lagging strand replication ; ;单林娜 制作;(4) Termination and segregation (终止与分离);单林娜 制作; 在大肠杆菌和枯草杆菌中，在OriC中形成的两个复制叉沿环状染色体双向移动，最后在与oriC相对的复制终止子ter终止。有6个复制终止位点。3个终止顺时针方向延伸的复制叉，3个终止反时针方向延伸的复制叉。Ter序列为22-23bp, 共有序列为 AA AA A NN G TGTTGTAACTA NNN TT TG