实时荧光定量PCR——TaqMan探针法及设计原则.pptVIP

实时荧光定量PCR——TaqMan探针法; 序列选取应在基因的保守区段； 避免引物自身或与引物之间形成4个或4个以上连续配对，避免引物自身形成环状发卡结构； 典型的引物18到24个核苷长。引物需要足够长，保证序列独特性，并降低序列存在于非目的序列位点的可能性。 Tm值在55－65℃，GC含量在40%－60%； 引物之间的TM相差避免超过2℃； 引物的3’端避免使用碱基A，引物的3’端避免出现3个或3个以上连续相同的碱基； 为避免基因组的扩增，引物设计最好能跨两个外显子； Taqman探针技术要求片段长度在50bp－150bp； 引物末端（最后5个核苷酸）不能有超过2个的G和C。 ;TaqMan探针设计原则;Taqman MGB 探针设计;此课件下载可自行编辑修改，供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更好！