三植物细胞骨架的光学显微镜观察.pptxVIP

细胞生物学实验课件 实验三植物细胞骨架的光学显微镜观察一.实验目的 1.掌握考马斯亮蓝R250?对植物细胞骨架染色的方法。 2.?通过对洋葱内皮细胞的处理，掌握植物细胞骨架的制备方法与显微形态观察。二.实验原理 细胞骨架(cytoskeleton)，是细胞内以蛋白质纤维为主要成分的网络结构，根据蛋白质纤维的直径、组成成分和组装结构的不同可分为微丝、微管和中等纤维。细胞骨架对于维持细胞的形态结构及细胞运动、物质运输、能量转换、信号传导和细胞分裂等有重要的作用。 本试验采用去垢剂TritonX-100?的缓冲液处理植物材料时，可将细胞的膜结构和大部分蛋白质抽提掉，但细胞骨架系统的蛋白却被保存下来，后者用考马斯亮蓝R250?染色，在光学显微镜下可见一种网状结构。 三.实验用品 1.材料：洋葱 2.器材：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、擦镜纸、50ml烧杯 药品：pH6.8的磷酸缓冲液； M-缓冲液 ：50mmolL-1 (PH?6.7)咪唑、 50 mmolL-1 KCl?、?0.5 mmolL-1 MgC12? 、 1 mmolL-1 ?EGTA?、 0.1 mmolL-1 EDTA?、?1 mmolL-1巯基乙醇、 4 mmolL-1甘油?、 1 mmolL-1 ?HCl?调pH?至7.2；1%Triton-X100:用M-缓冲液配 制；3%戊二醛：用pH6.8的磷酸缓冲配