细胞间管理规范.docVIP

细胞间管理实施条例 一 层流 1. 进入细胞间换鞋（肺科要求换鞋两次），或穿戴鞋套。 2. 穿白大褂，戴口罩帽子，戴手套，手套喷75%酒精。 3. 任何试剂、耗材及物品用75%酒精消毒，擦干净表面灰尘后方可进入细胞间。 4．即使只是瞬间拿试剂等操作，只要进入细胞间，必须穿衣戴帽。 5. 细胞间要求每天紫外照射灭菌，30min以上。 二 生物安全柜的使用 紫外照射20-30分钟灭菌。 酒精灯酒精不能低于最低刻度标尺，及时补充。 酒精灯按程序灭活，记得重复开盖再盖好，防止爆炸。 使用完毕清理废液缸，擦桌面，所有移液枪调回最大值，任何培养皿，管子不得留置于安全柜中。 使用过后除清理超净台，还要清理真空泵，瓶内体积不能超过2/3。 注意真空泵不带滤膜，所以用后必须清理，清洗过程如下： 结束实验时，用真空泵吸入75%的酒精，去除并清洗管子的液体。 将真空泵内液体倾倒进废液收集桶，用清水涮洗。 用酒精内外喷释壁，加入少量84消毒液，放置原处。 预约 （1）门口登记本预约，请合理估计使用时间进行预约。若约了后又不用，请及时擦除。 （2）上一个使用完毕的同学，清理超净台，紫外照射，进行正计时。 （3）若提早用完，如果方便请口头通知下一位同学。 8：00 HHH 9：00  表示从8：01分开始，到9：59分结束，包括自己照台的时间。 如果约台后超过45分钟未使用，后面约台的同学或未约台的同学可直接使用。 三 配液及公共试剂分装 配液及公共试剂分装必须遵循节约的原则，严禁浪费。 细胞间公共液体将分配到个人进行分装。 FBS：刘银 Glutamine：刘海玲 TE：李子依、吴秋 P/S:蒋征 负责试剂分装的同学，应及时检查分装试剂的库存，及时订购该试剂。当分装试剂不足时，其他同学有必要提醒该试剂负责人进行分装。 细胞所需培养试剂及血清尽量避免反复冻融。 培养液分装后用抗酒精笔标记。 配液操作及分装操作必须严格执行30分钟紫外消毒，配液及分装公共试剂前禁止一切其他操作。 每人独立使用自己的培养基，PBS，必须标明姓名、开启及配制日期。 所有自己配制的培养基要标明：试剂名称，姓名，日期。 所有试剂培养基都要用封口膜封好。 四 值日 原则上每周一人值日，同学之间也可以自行组合，两两一组，值日时间相应增长。不能够保证值日生每天等到最后一名同学做完实验离开，所以，每天最后一名离开实验室的同学，有义务处理不能过夜的垃圾等。 每周一交班 擦桌子，及柜子表面。 清空所有垃圾桶。 处理废旧橡皮筋。 加满75%酒精桶和95%酒精桶。检查84消毒液的用量。 处理病毒垃圾（每周1-2次）。 补充枪头盒，EP管盒及其它耗材，并及时订购缺少的耗材。 通知下一组值日同学，下一组值日同学可检查上一组完成情况，若没达到相关要求可拒绝接班，并可投诉至陈嘉瑜处。 每天 及时清洁垃圾筐，固体垃圾及液体垃圾在细胞间不过夜。最后一名做实验的同学在值日生不在的情况下，有义务进行垃圾清理。 清理空枪头盒收纳箱，一般内容物最好不要超过2/3。 及时添加新的枪头盒，EP管盒及其它耗材。 及时添加酒精喷壶内的75%酒精，若75%酒精桶或95%酒精桶内的酒精用完也需及时配置并添加。 值日同学负责检查耗材，通知相关负责人进行耗材的订取。 请值日同学认真完成相关工作，为大家创造良好实验环境。 由于值日工作量较大，也请其他同学能自觉维护细胞间的整洁，不要乱扔枪头，及时捡起地上杂物。如发现相关耗材的缺少，可提醒值日同学进行添加。 五 大扫除 大扫除时，跟随张帆老师实验室同时进行，时间为每周4下午6点30分。原则上，在肺科做实验的都应加入。 1 清理桌面及仪器外部（包括桌面，冰箱，培养箱，超净台，离心机） 2 超净台内部清洁 3 清理冰箱旧冰 4 水浴锅，刷烧杯 5 鞋架，刷鞋底 6 刷洗真空泵玻璃瓶 7 离心平衡管对整齐，包括内容水的刻度校准 8 地面杂物，包括超净台的脚支架的清洁，及冰箱、培养箱后面的死角 9 换新的白大褂 10 扫地，吸尘，拖地（包括超净台底下，培养箱后，冰箱后面） 11 照紫外30min. 通风1小时 12 更换病毒处理桶的耗材，并查看84消毒液情况 六 病毒处理： 病毒污染的耗材统一放入84消毒液浸泡处理（盖底分离），病毒液倒入收集罐加入84消毒液。 培养皿盖如未被污染无需进行消毒。 对于医用注射器，请拔出助推器后进行浸泡处理。不要简单的吸入消毒液，造成以后处理还需将液体推出。 每周大扫除时将其捞出，依普通实验垃圾处理。 浸泡桶每月至少更换1次新鲜84消毒液。病毒实验较多时，相应增加更换84消毒液的次数。 七 细胞间其它注意事项 显微镜使用：观察细胞时，短暂离开，可将光源调制最暗，使用过后将电源关闭