外源基因的表达、检测及遗传特性.pptxVIP

第三篇 外源基因的表达、检测及遗传特性;第一章 转化外源基因在植物细胞中的表达调控;第一节 转化外源基因的瞬时表达和稳定表达;1.外源基因瞬时表达的机制;2.外源基因瞬时表达的影响因素;3.外源基因瞬时表达的应用;二、转化外源基因的稳定表达;第二节 DNA序列对转化外源基因表达的调控;1. 组成型启动子;（1）CaMV35S启动子;（2）Nos和Oct启动子;2. 组织特异性启动子;3. 诱导型启动子;二、终止子的转录调控作用;三、5’，3’端序列对外源基因转录后的调控作用;1. 5’ 端帽序列的调控;2. 5’ 端先导序列的调控;3.poly(A)及其信号序列的调控;四、内含子对转化外源基因的表达调控作用;五、信号肽序列对转化外源基 因翻译产物的调控作用;第三节 甲基化对转化外源基因的表达调控;1. DNA甲基化的作用机制;2. DNA甲基化在转基因植物中的作用;第四节 提高转化外源基因表达的策略;第二章 外源基因整合的鉴定;第一节 Southern杂交;一、植物总DNA提取;1.植物总DNA提取原理及方法概述; 方法： 1.取1-50克新鲜植物材料，于液氮中研磨成粉。 2.将冻粉转入预冷的离心管中，立即加入等体积（w/v） 65 ℃预热的2 x CTAB提取缓冲液，充分混匀， 65 ℃ 保温10-20分钟，其间不时摇动。