临床微生物-—白喉棒状杆菌和炭疽芽孢杆菌.ppt

* * 皮肤炭疽（特征性黑炭样坏死） 炭疽相关性安全防护 特点： 生物战武器库中主要生物武器之一 皮肤炭疽容易治愈 肺炭疽最危险，按甲类传染病管理 防护： 专用实验室或指定区域；穿戴可处理的手套、工作服及防菌靴，可考虑使用头部装备和防尘面罩；操作台铺含消毒剂湿巾，用后浸泡消毒。 污染物焚烧、高压灭菌，不能高压灭菌的应浸入0.5%过氧乙酸10mins以上，也可用4%的高锰酸钾溶液浸泡15mins以上。 生物学特性——形态染色 革兰阳性大杆菌，两端截平或稍凹陷 有氧条件下形成芽胞、无鞭毛、可有荚膜 竹节样链状排列 革兰阳性竹节样排列大杆菌 芽胞——椭圆形，小于菌体，位于菌体中央 有氧条件、温度适宜（25--30℃），在培养基中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中，都易形成芽胞 在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞，尸 体严禁解剖 培养特性：易培养 需氧或兼性厌氧,最适T30-35℃，营养要求不高 普琼平板：灰白色、扁平、不透明、表面粗糙或毛玻璃样菌落, 菌落卷发状边缘（低倍镜下），在人和动物体内能形成荚膜。 炭疽杆菌粗糙菌落和卷发样边缘 培养特性 BAP：不溶血或24h后轻微溶血（可与其他需氧芽胞杆菌区别） 炭疽杆菌粗糙菌落和卷发样边缘（血平板） NaHCO3-BAP： --有毒株：5%CO2、37℃24--48h、产生荚膜呈黏液型菌落，挑取时呈粘丝状(鉴别要点) --无毒株：粗糙型菌落 肉汤培养基：沉淀生长（絮状沉淀），培养液澄清，无菌膜 明胶培养基：液化明胶，表面呈漏斗状 生化反应 分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、覃糖， 余- 硝酸盐还原试验+ 卵磷脂酶弱+ 触酶+ 明胶液化+ 卵磷脂酶试验阳性结果（甘露醇卵黄多粘菌素平板） 抵抗力 繁殖体抵抗力不强，但芽孢抵抗力强，在干燥土壤中或皮毛中常温下存活数十年致病力不减，牧场一旦污染，传染性可持续数十年 芽孢耐热、耐干燥 芽孢对氧化剂敏感（1：2500碘 10min、4%高锰酸钾 15min、0.5%过氧乙酸 10min ） 10%－30％福尔马林（4%－12%的甲醛）是最佳消毒剂，也可用10%次氯酸溶液消毒。 对青霉素、头孢类、链霉素、卡那霉素、四环素、氯霉素、红霉素等抗生素敏感 微生物学检查 标本的采集： 分泌物、痰、血液、粪便、呕吐物、脑脊液 严禁宰杀死畜。 标本的处理：液体标本取沉淀分离培养； 固体标本用生理盐水浸泡，水浴杀死非芽胞菌；血液等正常无菌性标本可直接肉汤增菌再分离培养。 检验方法 涂片染色：革兰阳性大杆菌、竹节状排列、有明显荚膜和芽胞。 分离培养：BAP或戊烷脒多粘菌素B等选择性培养基。 初步诊断 分离菌株具有典型的菌落形态，灰白色，不溶血或仅弱溶血， 镜下形态：革兰阳性竹节样链状排列大杆菌，有毒株有荚膜。 生化反应 噬菌体裂解 青霉素抑制 毒力试验 检验程序 皮毛、腐败脏器等 血液等 Ascoli试验 以NS制成悬液经加温或饱和尿素处理 肉汤增菌培养 BAP或戊烷脒平板 2%兔血清肉汤4-8h G染色镜检 菌落特征 动力观察 串珠试验 确定报告 荚膜肿胀试验 * 鉴定试验 串珠试验：接种待检菌于0.05－0.5U/ml青霉素培养基 37℃ 6h 形成大而均匀的圆球状菌体。 （类炭疽-） 青霉素抑制试验（青霉素5-、10+、100+U/ml） 青霉素串珠和抑制联合试验 噬菌体裂解试验（AP631炭疽噬菌体） 毒力试验：小白鼠动物试验 重碳酸盐毒力试验（含0.5%碳酸氢钠和10%马血清平板，5%CO2环境） 有毒株:粘液型菌落，有荚膜 无毒株：粗糙型菌落，无荚膜 * 炭疽杆菌串珠试验 * 青霉素串珠和抑制联合试验 CSF及炎症分泌物 2%兔血清肉汤快速增菌37℃4h 荚膜肿胀试验 直接涂片 荚膜染色 G染色 初步报告 0.2ml注射小白鼠腹腔，8h后解剖 涂片G染色、荚膜染色 初步报告 * Thank you for your attention! * * * * Inactivates 灭活，prevent 防止 预防 阻止，ribsome核蛋白体核糖体 * * * * * * * 生物学特性 G+杆菌，大小、长短不一， 排列呈L、V等字母形 异染颗粒 革兰染色×1000 Neisser染色×1000 形态特点 奈瑟染色 革兰染色 革兰染色 形态特点 异染颗粒 成分： 核糖核酸 + 多偏磷酸盐 作用： 储存养料，有鉴定价值 Albert染色 奈瑟染色 培养特性 *吕氏血清斜面培养物 含凝固的血清，生长迅速，异染颗粒明显。 *亚碲酸钾血平板 黑色菌落