临床色谱质谱检验技—第三章生物样品制备技术.pdf

第三章 生物样品制备 临床基因组教研室刘伟霞 邮箱：gz-liuweixia@ 2018.03.23 目 录 Contents 一. 常用样品制备技术 二. 自动化样品制备技术 三. 小结与思考 一、常用样品制备技术 临床色谱质谱实验室常用样品制备技术 衍生化 稀释 固相萃取 样品制备技术 蛋白沉淀 过滤 离心 液液萃取 （三）固相萃取（solid-phase extraction,SPE ）  定义  是一种基于液相色谱分离的样品制备方法，依据样品基质各种组分在固定相和流动相间 分配系数的不同，使目标分析物得以保留和净化，同时选择性地去除样品基质中的干扰 成分。 （三）固相萃取（solid-phase extraction,SPE ）  SPE结构  SPE产品形式  针筒形式  过滤嘴形式  96孔板形式  在线 SPE柱 （三）固相萃取（solid-phase extraction,SPE ）  工作模式 （三）固相萃取（solid-phase extraction,SPE ）  基本操作步骤（以反相萃取为例） •依次用强溶剂进行活化，弱溶剂进行平衡，创 预 造萃取柱的溶剂环境。 处理 •弱溶剂溶解样品，使目标物保留在SPE柱上。 上样 •用一定强度的溶剂淋洗，去除干扰杂质，而分 淋洗 析物有效的保留在柱上。 •选择适当的洗脱溶剂，将目标物从柱上洗脱下 洗脱 来。 （三）固相萃取（solid-phase extraction,SPE ） 分离 反相、正相、离子交换 模式 注意洗脱溶剂的强 展开碳链，增加吸 洗脱 柱预 度、选择性、流速 附剂和目标分析物 溶剂 处理 作用的表面积，增 萃取效率影响 因素 强保留。 目标物应是游离的，不能 淋洗 上样