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PAGE 1 PAGE 叶绿素a测定复习试题 一、填空题 1.叶绿素a的测定方法有 和 ，环境监测(生物)技术规范中规定用 。 答：分光光度法；荧光光度法；分光光度法； 2.进行生物样品污染物测定的样品处理可概括为二个过程：第一步是将样品 、 、 ；第二步是将前一步处理过的样品 以消除干扰，提高被测组分的浓度。 答：分离；纯化；浓缩；分解消化或提取。 3.经丙酮浸取含有叶绿素a的溶液，以 溶液为参比，在波长 、 、 、 下测定吸光度。在波长 测定丙酮溶液的空白值。丙酮溶液空白值应不大于 。 答：丙酮；663nm；645nm；630nm；750nm；0.05。 4.经离心后的样品上清液，在750nm处测定吸光度，用以校正提取液的 ，当测定用1cm比色皿，吸光度超过 时，提取液应 。 答：浊度；0.005；重新离心。 二、问答题 1. 控制叶绿素a指标值的意义是什么？ 答：叶绿素a是反映水体富营养化的一个重要指标。控制叶绿素a就在于控制富营养化和藻类生物量，从而揭示湖库富营养化发生的内在实质。 2. 叶绿素a的涵义是什么？ 答：指水中藻类具有光合色素的叶绿素。 3.什么叫富营养化？ 答：营养物质特别是含氮和磷的化合物，在淡水或盐水中的富集。富营养化加速了藻类和较高等植物的生长。 4.用于叶绿素a测定的水样应如何保存？ 答：每升水样加1%碳酸镁悬浊液1ml，以防止酸化引起色素溶解。如不能 立即测定，则应在低温(0—4℃)避光保存。 5.叶绿素a测定方法的原理是什么？ 答：原理是：以丙酮溶液提取浮游植物色素，浸取液经过滤离心后，依次在663、645、630nm波长下测定吸光度，按Jettrey—Humphrey方程式计算，可得出叶绿素a的含量。 6.一般用于测定叶绿素a的样品采集多少量较合适？ 答：通常采样体积可根据水中叶绿素a含量的高低来确定，一般可采取1.5—2升。按浮游植物采样方法，湖泊、水库采样500毫升，池塘300毫升，按海洋监测方法规定，海水采取2—5升。 7.什么叫中营养水？ 答：天然发生的，或由于营养累积形成的中等营养状态的水，及介于贫营养和富营养之间的水。 8.简述叶绿素a测定操作步骤？ 答：⑴.样品制备：在每升水样中加入1mL1%碳酸镁悬浮液，混匀，用滤膜过滤。过滤负压不得超过50 kPa。 ⑵.样品提取：用10mL90%丙酮溶液浸泡滤膜，置于冰箱冷藏12—24h，提取叶绿素a。 ⑶.样品离心：以3000—4000转/分，离心十分钟。 ⑷.样品测定：用分光光度计，以90%丙酮溶液为参比，分别在750nm、663nm、645nm、630nm波长下测定吸光度。 9.如果样品过滤后不能马上测定，应该怎么做？ 答：若滤得样品不能及时提取，应该将滤膜抽干，对折后再套上一张滤纸，置于含硅胶的干燥器内，贮存在低于1℃的冰箱中。 10.试写出测定叶绿素a的计算公式，并指出各符号的意义？ 答：叶绿素a(μg/L)＝［11.64(663－E750)－2.16(E645－E750)＋0.10(E645－E750)］×ν/V.δ E——吸光度值 v——样品提取液体积ml V——样品体积L δ——比色皿厚度cm 三、计算题 1.采集某一水库的样品500毫升，进行叶绿素a的检测，测得的结果是：750nm处吸光度值0.002；663nm处吸光度值0.849；645nm处吸光度值0.486；630nm处吸光度值0.209；请计算该样品叶绿素a的含量。用地表水质量标准评价该水质为几类标准？ 答：叶绿素a(mg/L)＝(11.64×0.847－2.16×0.484＋0.10×0.207)×10/500 ＝0.177 根据与地表水质量标准比较，此水质为超Ⅴ类标准。