绪论及蛋白质化学.pptxVIP

第一章　　绪论;　　　生物化学既是各门生物学理论学科（细胞生物学、分子生物学、遗传学、微生物学、免疫学、临床医学、诊断医学等等）的基础，同时也是制药工程学、食品和营养学等多门应用学科的基础。;第二章　蛋白质化学;蛋白质的组成和分类： 元素组成上的特点：含N量较高，且恒定为16%左右 蛋白质含量(%)=含氮量/16% 　　　　　　　　 =含氮量×6.25 (凯氏定氮法测蛋白质含量的基础) 蛋白质的分类 ;蛋白质的组成单位：　氨基酸;氨基酸分子上碳原子的编号;氨基酸分子手性碳的参考标准;氨基酸的分类;　非极性氨基酸： Ala (A, 丙氨酸） Val (V, 缬氨酸) Leu ( L, 亮氨酸) Ile (I, 异亮氨酸） Met （M, 甲硫氨酸） Phe （F, 苯丙氨酸) Trp (W, 色氨酸) Pro (P, 脯氨酸） Tyr (T, 酪氨酸) Gly (G, 甘氨酸） ;极性但不带电荷的氨基酸： Ser (S, 丝氨酸） 　　Thr (T, 苏氨酸） Asn (N, 天冬酰胺) Gln (Q, 谷氨酰胺) Cys (C, 半胱氨酸) ;极性带电荷氨基酸： 酸性氨基酸： Asp ( D, 天冬氨酸) Glu (E, 谷氨酸) 碱性氨基酸： His (H, 组氨酸) Lys (K, 赖氨酸) Arg ( R, 精氨酸);修饰氨基酸;氨基酸的一般性质：;酪氨酸和色氨酸的紫外吸收;氨基酸的两性性质和等电点;全质子化的甘氨酸的滴定曲线; 　　Handerson-Hasselbalch公式： 〔proton accetors〕 pH=pK′+ lg 〔proton donors〕 ; 氨基酸的甲醛滴定 由于甲醛能与氨基酸中的-NH2 作用形成-NHCH2OH、-N(CH2OH)2 等羟甲基衍生物，使氨基酸向解离出H＋ 的方向移动，表现为酸性增强，碱性减弱（约2～3个pH单位）。;氨基酸的甲醛滴定曲线;氨基酸的化学反应：; 氨基酸侧链的反应： 　米伦反应： Tyr 福林反应： Tyr 　坂口反应： Arg 　Pauly反应： His, Tyr 　乙醛酸反应：Trp ;氨基酸的离子交换层析：;分离氨基酸混合物常用强酸型阳离子交换树脂： 用碱处理交换柱，树脂变成Na+型，调氨基酸混合物至pH2-3，使氨基酸变成阳离子，与Na+交换而挂在树脂上。 氨基酸与树脂结合的牢固程度取决于： 静电引力 　(主要) 疏水相互作用 　(次要);氨基酸自动分析仪原理示意图;水解方法;蛋白质的结构;蛋 白 质 的 结 构 层 次 及 相 互 关 系;蛋白质的一级结构：;肽键的方向和表示方式;　肽单位的结构;肽和蛋白质特有的颜色反应：双缩脲反应;蛋白质样品　(纯度 97％）;断裂二硫键的方式;水解后氨基酸组成的分析;确定N-末端的方法： １. 2,4-二硝基氟苯法（DNFB法）和丹磺酰氯法（DNS法）;２. Edman降解法（苯异硫氰酸酯法）;确定C-末端的方法：;２．羧肽酶法;裂解多肽链成小片断的方法：; 　　　　3．酶裂解法 　　　　胰 蛋 白 酶： R1 = Lys、Arg, R2 ≠ Pro 糜 蛋 白 酶： R1 = Phe、Tyr 、Trp, R2 ≠ Pro （胰凝乳蛋白酶） 　　　　胃 蛋 白 酶： R1和R2＝Phe、Leu、Trp、Met 葡萄球菌蛋白酶： R1＝ Glu, Asp 羧状芽孢杆菌蛋白酶： R1 = Arg;二硫键位置的确定：对角线电泳;借助重叠肽确定肽段在原多肽链中的次序;蛋白质的二级结构; 由于肽键是一个刚性平面，所以羰基碳原子与氮原子之间的C’－N键是不能自由旋转的。但围绕α碳原子的C α－C’键以及C α－N键是可以自由旋转的。这两个键所形成的相对角度确定了蛋白质主链的特