杨学明微生物和免疫学医学免疫学实验第三次实验.pptVIP

;;凝集反应;; 掌握酶联免疫吸附试验（ELISA）的实验 原理和操作方法。; 将已知抗原或抗体吸附在固相载体（聚苯乙烯微 量反应板）表面，使抗原抗体反应在固相表面进行， 通过洗涤将固相上的抗原抗体复合物与液相中的游离 成分分离。 ELISA 检测通常分为直接法、间接法、双抗夹心 法和竞争抑制法，间接法适用于各种抗体的检测，双 抗夹心法用于检测液相中的可溶性抗原。;; 将已知抗体吸附在固相上，加入待测标本，标本 中的抗原与固相上已知抗体结合，再加入酶标抗??， 通过洗涤去除未吸附的抗体、未结合的抗原及酶标抗 体，加底物后，酶分解底物显色。;;1. 预包被可拆微孔板条（包被HBsAb） 2. 阳性对照（基因工程HBsAg） 3. 阴性对照（正常人血清） 4. 酶标抗体（HRP标记的HBsAb） 5. 样品稀释液（含BSA缓冲液） 6. 洗涤液 7. 底物A液、底物B液 8. 终止液 9. 微量加样器、即时贴、37℃恒温箱、吸水纸等。;乙型肝炎病毒表面抗原检测（双抗夹心法） 1. 平衡： 　　将试剂盒各组分从盒中取出，室温平衡30分钟， 微孔板开封，余者即时以自封袋封存。 2.编号： 取所需数量微孔板固定于支架，设阴性、阳性、 空白对照，并按序编号。;3. 稀释： 每孔加入20μl 样品稀释液