遗传病的分子诊断.pptxVIP

遗传性疾病的分子诊断 李世宝 sdjnshlb@163.com概 述 遗传性疾病 是由遗传物质改变所导致的疾病或缺陷，按一定的方式垂直传递。 我国每年新出生人口中6％患有不同的遗传病，新增遗传病患儿约120万 遗传病的发病率逐渐升高遗传病的分类单基因遗传病基因病 染色体病体细胞遗传病 多基因遗传病一、单基因遗传病的分子诊断定 义单基因遗传病 (monogenic disease) 指单个基因突变所引起的遗传病。 特点：病种较多，单个疾病发病率低临床表现复杂多样遗传规律符合孟德尔定律1.单基因遗传病发病的分子机制单基因遗传病的基因突变类型① 基因的外显子或内含子完全或部分缺失② 基因的单碱基突变③ 三核苷酸重复突变④ 基因部分片段重复转录，基因产物大小改变⑤ 插入突变，基因组其他部位的DNA片段插入到目的DNA序列内2.单基因遗传病的分类 常染色体显性遗传 常染色体隐性遗传 X连锁显性遗传 X连锁隐性遗传 Y连锁遗传(1) 常染色体显性遗传 (autosomal dominant inheritance, AD)致病基因位于常染色体一对等位基因中只要有一个致病基因就可表现出基本性状男女患病机会相等如：先天性软骨发育不全病、亨廷顿病(2) 常染色体隐性遗传 (autosomal recessive inheritance, AR)致病基因位于常染色体携带一个隐性致病基因的杂合子不表现症状，只有获得一对隐性基因的纯合子才表现出相应症状男女受累机会均等如：苯丙酮尿症、白化病(3) X连锁显性遗传 (X-linked dominant inheritance, XD)致病基因位于X染色体以显性遗传的方式向后代遗传男性患者的女儿全部为患者，儿子全部正常，女性患者的子女中各有50％可能性是患者如：葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症、假性甲状腺功能减退病(4) X连锁隐性遗传 (X-linked recessive inheritance, XR)致病基因位于X染色体女性在纯合子时表现出相应性状；携带一个隐性致病基因时，为表型正常的致病基因携带者男性X染色体上有一个隐性致病基因就会发病如：甲型血友病、红绿色盲(5) Y连锁遗传 (Y-linked inheritance, YL)致病基因位于Y染色体伴随Y染色体以显性遗传方式向男性后代传递只有男性才表现出相应性状如：外耳道多毛症3.单基因遗传病的基因诊断表型诊断 根据症状体征来判断病因并诊断分子诊断（基因诊断） 直接检测患者基因(DNA)或其转录产物(mRNA)诊断疾病 基因诊断是当前诊断遗传病最精确的方法(1) 基因诊断的思路从蛋白质入手从蛋白质到核酸，由表型至基因型从DNA入手由DNA到蛋白质从候选基因入手从蛋白质入手明确蛋白产物测定蛋白质的氨基酸序列合成DNA探针筛选编码基因或cDNA克隆DNA测序确定导致疾病的分子缺陷从蛋白质入手通过该策略诊断许多单基因遗传疾病白化病苯丙酮尿症镰状细胞贫血该策略已较少采用 从DNA入手连锁分析确定致病基因的染色体定位在该区域内搜索、分离致病基因找到导致遗传病的分子缺陷阐明正常与异常基因产物的生理功能和病理效应从DNA入手当前遗传性疾病诊断的主要策略杜氏肌营养不良亨廷顿舞蹈病该策略的关键是DNA标志物从候选基因入手将某一疾病基因初步定位以该区域中已克隆的无名基因、cDNA等为候选者根据定位结构是否相同来鉴定疾病相关基因此方法具有速度快、效率高的优点(2)基因诊断的途径确定单基因遗传疾病后，再确定基因检测的方法采集先证者及其父母的DNA；携带者基因分析时，需采集与患者、携带者有血缘关系的亲属样品从人体组织的有核细胞中提取分离DNA外周血有核细胞、口腔黏膜、毛囊细胞(2)基因诊断的途径DNA印迹法(Southern blotting) 分析基因或基因片段的缺失、插入或动态突变PCR及其衍生技术 分析核苷酸取代、缺失或插入造成的点突变基因芯片技术 自动化、微量化、高通量4.单基因遗传病基因诊断中存在的问题(1) 遗传异质性(genetic heterogeneity) 由同一或不同基因座的不同突变所致的非常类似的表型 同一种表型可由多个不同的基因型控制 大多数遗传病都有遗传异质性 遗传异质性1) 等位基因异质性 由同一基因座不同突变所致非常类似的表型β地中海贫血可由100多种突变引起2) 基因座异质性 由不同基因座不同突变所致非常类似的表型4.单基因遗传病基因诊断中存在的问题(2) 基因突变的多样性基因突变包括缺失、插入、替换和动态突变等(3) 临床诊断是基因诊断的基础 基因诊断前注意临床诊断的准确性多数遗传病需依靠多态性标志物进行家系连锁分析，确定疾病相关基因4.单基因遗传病基因诊断中存在的问题(4)基因诊断方法的选择根据基因诊断的目的慎重选择方法