《生物化学》课件-酶学.pptVIP

第三章 酶学 目 录 第一节 酶的概念及作用特点 酶及生物催化剂概念的发展 酶专一性类型 绝对专一性和相对专一性 消化道内几种蛋白酶的专一性 消化道蛋白酶作用的专一性 酶的化学本质及类别 第二节 酶的命名和分类（略讲） 第三节 酶催化作用的结构基础和 高效催化的策略 酶催化的中间产物理论 二、酶的活性中心 胰凝乳蛋白酶的活性中心 羧肽酶活性中心示意图 差示标记法图解 亲和标记法 三、酶作用专一性机理 酶专一性的“锁钥学说” 酶专一性的“诱导契合学说” 四、酶高效催化的策略 酶分子中可作为亲核基团和酸硷催化的功能基团 羧肽酶结合底物前后构象变化 差示标记法图解 溶菌酶催化的反应 溶菌酶-底物复合物 溶菌酶活性中心与底物结合示意图 溶菌酶底物D环变形模型 溶菌酶催化反应机理 羧肽酶活性中心Zn2+的中心作用 羧肽酶活性中心必需基团与底物间的结合 羧肽酶结合底物前后构象变化 羧肽酶活性中心的共价催化机理 羧肽酶活性中心的共价催化机理 RNase-底物复合物 RNase活性中心的酸硷催化机理 核糖核酸链受Rnase水解的位点 胰凝乳蛋白酶分子中催化三联体构象 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制（1） 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制（2） 第四节 酶促反应的动力学 酶促反应速度的测定与酶的活力单位 酶促反应初速度的概念 酶活力测定方法  酶活力的表示方法 2、底物浓度对酶反应速度的影响 酶反应速度与底物浓度的关系曲线 米氏方程的三个假设 中间产物学说： E + S ES E + P （1）反应开始， [P]很低，由P+E ES 可忽略不计，即： E + S ES E + P 米氏方程推导过程 E + S ES E + P [E] [S] [ES] [E] 游离酶浓度 [E] = [E]t－ [ES] ES生成速度 v 1= k1[E] [S] ES分解速度 v 2 = k2 [ES] + k3 [ES] 当稳态时： ES生成速度= ES分解速度 v 1 = v 2 k1 [E] [S] = k2 [ES] + k3 [ES] ＝(k2 + k3) [ES] 米氏常数的意义 米氏常数的测定 酶动力学的双倒数图线 3、pH对酶反应速度的影响 4、温度与酶反应速度的关系 5、激活剂对酶作用的影响 6、抑制剂对酶作用的影响 抑制剂类型和特点 竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用 反竞争性抑制作用 竞争性非竞争性抑制作用机理示意图 竞争性抑制曲线 非竞争性抑制曲线 反竞争性抑制曲线 有无抑制剂存在时酶促反应的动力学方程 非专一性不可逆抑制剂 专一性不可逆抑制剂 专一性不可逆抑制 Ks型：该种抑制剂具备底物的类似结构可以和酶结合，同时还有一个活泼的化学基团，作用于酶分子中的必需基团。 如：有机汞：专一作用于巯基 有机磷农药：专一作用于丝氨酸羟基 如乐果、敌百虫等 Kcat型： 结构及作用特点： 抑制剂为底物的类似物，但其结构中潜藏着一种化学活性基团，在酶的作用下，潜在的化学活性基团被激活，与酶的活性中心发生共价结合，不能再分解，酶因此失活。 例 子 Ks 对甲苯磺酰-L-赖氨酰氯甲酮TLCK 结合胰蛋白酶的His57 Kcat B-卤代-D-Ala抑制丙氨酸消旋酶 用自杀性底物对付抗青霉素的菌株 青霉素分子 耐药性产生的原因 解决耐药性的方法 对青霉素酶不敏感的青霉素新品种 第五节 重要的酶类及酶活性的调节控制 一、多酶体系和多酶复合体 二、酶的别构（变构）效应和别构酶 酶的别构（变构）效应示意图 别构酶与米氏酶的动力学曲线比较 正、负协同别构酶与非调节酶的动力学曲线比较 ATCase所催化的反应 E.coli的ATCase的亚基排列 ATCase的半分子结构 ATCase的别构过度作用 PALA(N-磷乙酰-L-天冬氨酸)结合到ATCase活性中心的模型 ATCase变构效应的动力学特征 别构酶的序变模型 别构酶的齐变模型 三、酶的共价修饰 蛋白质的磷酸化和脱磷酸化 共价修饰反应的例子 级联系统调控糖原分解示意图 四、酶 原 的 激 活