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高尔基复合体 1898 高尔基(Golgi)-银染神经细胞----高尔基体---高尔基复合体 一.高尔基复合体的形态结构 相对恒定连续的整体膜结构 光镜:网状结构 大囊泡(vacuoles)电镜扁平囊泡(cisternae)小囊泡(vesicles)呈极性的细胞器形成面各部分膜囊具有不同的细胞化学反应,可用来进行鉴别顺面网状结构(cis Golgi network)[CGN]扁囊弯曲成凸面又称形成面(forming face)或顺面(cis face) 特征: 位于顺面最外侧的扁平膜囊。中间多孔呈连续分枝状。可被锇酸特异性染色。 嗜锇反应,经锇酸浸染后, 高尔基体的顺面膜囊被特异地染色;功能:接受内质网新合成的蛋白质与脂类,将其分类后大部分转入中间膜囊,小部分再返回内质网。 中间膜囊特征: 位于顺面网状结构与反面网状结构之间 由扁平囊与管道组成。 标志酶:NADP酶 烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶(NADP酶)的 细胞化学反应,是高尔基体中间几层扁 平囊的标志反应.功能:糖基修饰糖酯形成多糖的合成 反面网状结构(trans Golgi network)[TGN]面向质膜的凹面又称成熟面(mature face)或反面 特征: 位于反面的最外层。 形态为管网状,与反面囊泡相连, 另一侧深入细胞质中。 标志酶:TPP酶,CMP酶 焦磷酸硫胺素酶(TPP酶)的细胞化学反应, 可特异地显示高尔基体的反面1-2层膜囊; 胞嘧啶单核苷酸酶(CMP酶)的细胞化学反应,可显示靠近反面上的一些膜囊状和管状结构,CMP酶也是溶酶体的标志酶,溶酶体是在此产生的。功能:参与蛋白的分类与包装,运输。周围小泡顺面侧的囊泡,小囊泡[vesicles]: 内质网与高尔基体间的运输小泡。反面侧的囊泡,大囊泡[vacuoles]: 体积较大,运输作用分泌泡与分泌颗粒。 大 囊 泡Φ100-150nm;膜厚:8nm;泡内含物质:高电子密度物质,浓缩泡。来 源:扁平囊周边或局部球状膨突脱落形成。扁 平 囊呈盘状,3-10层称-----高尔基堆扁平囊间距:20-30nm;囊腔宽:6-15nm形成面膜薄: 6nm ; 成熟面膜厚:8nm囊腔内含:中等电子密度的物质中间膜囊作用:多数糖基修饰;糖脂的形成; 来 源:小囊泡融合。小 囊 泡Φ30-80nm球形小泡,膜厚:6nm;泡内含物质:低电子密度物质,较透明。来 源:由rER‘芽生’而来。凸面:形成(顺)面;凹 面:成熟(反)面 二.高尔基复合体的分布和数量 根据细胞类型不同,分布状态有所不同: 神经细胞---核周围交织成网;肝细胞---分散分布; 有极性的上皮细胞---核顶部,顺面朝向内质网,反面朝向质膜。 根据分化程度和功能状况,其发达程度和数量不同: 分化程度、分泌功能↑→数量↑(多达数千) (胰腺外分泌细胞、浆细胞) 未分化的胚胎细胞、分泌功能不旺盛的肌细胞和淋巴细胞→数量↓ 三.高尔基复合体的化学组成 高尔基复合体膜,内质网膜,细胞膜化学组分上的对比 粗面内质网膜 高尔基复合体膜 细胞膜 总磷脂61% 45% 40% 卵磷脂47.8% 31.4% 32.0% 胆固醇0.12 0.47 0.51从形成面到成熟面多糖的含量呈梯度上升趋势 含有多种酶 :特征酶:糖基转移酶四. 高尔基复合体的功能 高尔基复合体与细胞的分泌活动 参与糖蛋白的合成和修饰 参与蛋白质的改造 对蛋白质的分拣运输 高尔基复合体与溶酶体的形成 高尔基复合体与膜的转变。(一)高尔基复合体与细胞的分泌活动 90分钟 ? 3H标记亮氨酸 加入培养基内,在不同的时间内收集细胞做放射性自显影. 20分钟 高尔基复合体参与了细胞分泌活动,并起着重要的运输作用;在分泌颗粒的形成过程中起着浓缩、修饰、加工等作用。3分钟 分泌蛋白质的分泌途径 进入细胞内膜泡运输内质网腔(修饰)蛋白质在rER的核糖体上合成细胞内贮存酶原颗粒浓缩泡高尔基复合体(加工修饰) 分泌泡分泌物排向胞外 分泌过程概括为六个阶段:1 核糖体阶段-------肽链的合成;2 内质网腔阶段-----肽链延伸、加糖、折叠与储存;3 胞内运输阶段-----分泌蛋白转运,以出芽方式形成运输小泡,移向高尔基体并与扁囊 融合;4 分泌蛋白浓缩阶段---由形成面向分泌面移动,完成浓缩、加工,形成浓缩泡脱离进入 胞质中;5 胞内储存阶段-----继续浓缩,等待释放;6 胞吐阶段---------浓缩泡向细胞顶端移动,最后与质膜融合,排到胞外。糖蛋白:N-连接的寡糖链:在rER腔内合成。(
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