植酸酶工业化发酵生产技术的研究.ppt

植酸酶发酵生产技术研究 ;一、酶制剂在饲料中的应用;目前世界上生产用酶多达300多种，饲料用酶近20种，主要有： α-淀粉酶 糖化酶 蛋白酶 纤维素酶 木聚糖酶 β-葡聚糖酶 α-半乳糖苷酶 β-甘露聚糖酶 果胶酶 植酸酶 葡萄糖氧化酶 黄曲霉毒素分解毒; 植酸酶(EC 3.1.3.8或者EC3.1.3.26，肌醇六磷酸盐磷酸水解酶) 是催化植酸及植酸盐水解为肌醇和磷酸（或磷酸盐）的一类水解酶的统称。目前已知的植酸酶包括肌醇六磷酸3-磷酸水解酶、肌醇六磷酸6-磷酸水解酶。 植酸酶是一种环保型饲料添加剂???能使饲料中植物有机磷得到有效的利用，从而减少畜禽养殖业对环境中的磷污染；并可解除植酸的抗营养作用，改善畜禽生长性能，提高饲料的利用率，并促进动物对蛋白质、氨基酸和碳水化合物的消化吸收。; 植酸酶是一种新型的食品添加剂，能够降低食物中的植酸而改善人体对磷、锌、钙、铁等矿物质的吸收；或作为食品加工助剂，在加工时减少食品中植酸的含量，改善食品性能，提高营养价值。在医药工业中，植酸酶用于生产低磷酸肌醇或肌醇。 另外，在酒精工业，植酸酶可促进发酵、提高酒精产量、减少杂质生成，并能显著降低蒸馏清液和酒糟中的植酸含量；植酸酶还可作为肥料添加剂，分解转化土壤中的植酸，以释放出无机磷，进而提高土壤中磷的利用率和土壤磷素的含量。;三、植酸酶发酵生产;2、植酸酶的固态发酵生产 固体发酵法是以麸皮、玉米淀粉、黄豆饼粉等农副产品或加工废弃物，如稻草、米糠、榨油后的油饼（如椰子油饼、芝麻油饼、棕榈油饼、花生油饼）等为主要原料，微生物是在有足够湿度的固态底物上进行反应，发酵环境接近于自然状态下的微生物生长习性，产生的酶系更全，可直接加工成饲料用酶。 固体培养设备比较简单、成本低、产生的废弃物少、易于推广，但放大比较困难、培养参数控制较复杂、容易污染杂菌，而且生产的植酸酶分离纯化较复杂。;3、植酸酶的液态发酵生产 液态发酵的培养条件容易控制，不易污染杂菌，生产效率高。目前植酸酶的工业化生产主要采用液态发酵工艺。;目前主要是以基因工程手段得到植酸酶的高产菌，并与高密度发酵工艺相结合，实现植酸酶的高效生产。 国内外用于表达植酸酶基因的宿主细胞主要是毕赤酵母（Pichia pastoris）。发酵工艺包括：种子培养→接入发酵罐细胞培养→流加碳源实现细胞的高密度培养→外源植酸酶基因的诱导表达等阶段。;研究的工艺参数： 培养基 培养条件 高密度发酵工艺（补料工艺、诱导工艺等） 制剂技术 液态酶的稳定条件 ;目前植酸酶主要用于饲料行业，发酵后的酶液经菌体去除、浓缩（生产低酶活产品不需浓缩）、与载体混合、干燥等工序得到成品，产品中含有部分菌体、发酵培养基及其它杂质，应用分离技术生产理化、微生物指标要求更高的植酸酶产品，使之在食品与医药工业得到应用。 通过高效基因工程菌构建、发酵工艺优化等技术手段，降低植酸酶的生产成本、提高植酸酶的生产效率，并生产不同条件下作用的植酸酶品种，应用于生物肥料等新领域。 探索耐热植酸酶基因工程菌构建，或通过制剂技术提高植酸酶的耐热性以提高其使用效率与范围。 工程菌的安全性评估。 ;经160h发酵（30-90h混合诱导，90-160甲醇诱导）酶活平均为28537U/mL。;经160h发酵（30-90h混合诱导，90-160甲醇诱导）酶活平均为28214U/mL。与进口甲醇相比差别1%。;四、不同甲醇补料速度试验;五、植酸酶的低盐发酵试验;原发酵培养基中的MgSO4从1.5%减至1.2%（图C）、NH4H2PO4 从4%减至3%（图D），结果表明酶活无显著差异。;原发酵培养基中的主要盐类全部减少15%（低盐1）和30%（低盐2），结果表明减少30%对菌体生物量和酶活都有显著的影响。生产中可对原发酵培养基中的主要盐类减少15%。;谢谢！ 欢迎光临温州大学指导！;