进展-细胞死亡.pptxVIP

细胞死亡;细胞凋亡 细胞坏死 自噬性死亡 ……;Apoptosis Apo 从… ptosis 飘零，落下 细胞象秋天的树叶一样凋落的死亡方式 ;左，正常胸腺细胞；右，凋亡胸腺细胞 ;2002年诺贝尔生理与医学奖获得者 ;一、细胞凋亡的研究历史、概念 二、细胞凋亡的形态学和生物化学特征 三、细胞凋亡与肿瘤等疾病 ;一、细胞凋亡的研究历史、概念;Apoptosis;;（二）细胞凋亡的概念; 生物学意义 细胞凋亡对于多细胞生物个体发育的正常进行，自稳平衡的保持以及抵御外界各种因素的干扰方面都起着非常关键的作用。 　　　;一、细胞凋亡的研究历史、概念 二、细胞凋亡的形态学和生物化学特征 三、细胞凋亡与肿瘤等疾病 ;二、细胞凋亡的形态学和生物化学特征;（一）细胞凋亡的形态学特征;凋亡细胞早期;细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期： 早期的细胞核呈波纹状或呈折缝样部分染色质出现浓缩状态；中期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；晚期的细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体;（二）细胞凋亡的生化特征;细胞色素c诱导的凋亡细胞DNA电泳图 1．细胞色素c诱导0 h 2．细胞色素c诱导1 h 3．细胞色素c诱导2 h 4．细胞色素c诱导3 h 5．细胞色素c诱导4 h 6．阴性对照 7．Marker ;（三）诱导细胞凋亡的因子;1. 细胞凋亡的形态学检测 2. 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） 3. 线粒体膜势能（??mt）的检测 4. DNA片断化检测 5. TUNEL法 6. Caspase-3活性的检测 7. WB检测 8. 凋亡相关蛋白的表达和细胞定位分析 ; 1. 细胞凋亡的形态学检测;2.磷脂酰丝氨酸（PS）外翻分析 （Annexin V法）;Annexin V-FITC Fluorescence;;; 3. 线粒体膜势能（??mt）的检测; Bcl-2家族与线粒体相关细胞凋亡;线粒体凋亡信号途径 ;;荧光素（fluorescein）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下，可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端，并与连接辣根过氧化酶（HRP，horse-radish peroxidase）的荧光素抗体特异性结合，后者又与HRP底物二氨基联苯胺（DAB）反应产生很强的颜色反应（呈深棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在光学显微镜下即可观察凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA断裂，因而没有3‘-OH形成，很少能够被染色。;（TdT-mediated dUTP nick end labeling ）;◆Caspase家族 Caspase活性位点是半胱氨酸(Cysteine)， 裂解靶蛋白位点是天冬氨酸残基后的肽 键，因此称为Cysteine aspartic acic specific protease，即Caspase;;Caspase活化;;荧光物质偶联的短肽;7. WB;8. 凋亡相关蛋白的表达和细胞定位分析 ;;一、细胞凋亡的研究历史、概念 二、细胞凋亡的形态学和生物化学特征 三、细胞凋亡与肿瘤等疾病 ;三、细胞凋亡与疾病;2、自身免疫疾病 ——胸腺对T细胞正负选择障碍 正选择：与非已抗原-MHC抗原结合的TCR的单阳性细胞保留存活，进入外周T细胞库 负选择：与自身抗原-MHC抗原结合的TCR的双阳性细胞被凋亡清除;（二） 细胞凋亡过度;心肌缺血和IRI凋亡特点;;;老年性痴呆与细胞凋亡;;3. HIV感染导致CD4＋淋巴细胞凋亡过度;（三） 细胞凋亡不足与过度并存;细胞凋亡在疾病防治中的意义;2．干预凋亡信号转导;wtP53 修复受损的DNA，如修复失败则诱导细胞凋亡;4． 控制凋亡相关的酶;5． 防止线粒体跨膜电位的下降;第二部分 其他细胞死亡方式;“auto”+”phagein”= Autophagy;自噬体（autophagosome） 内涵体（endosome） 自噬内涵体（amphisomes）自噬溶酶体（autophagolysosome）;;Autophagy;副细胞凋亡（Paraptosis） ;胀亡 ： oncosis;细胞凋亡与程序性细胞死亡 （Apoptosis and Programmed Cell Death） ;内吞死亡 ： entosis;THANKS