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乳与乳制品病原微生物检验方法粪链球菌群的检测
YLNB 4.8
1. 仪器及器材
1.1 培养箱： 36 ±1℃
1.2 冰箱： 0~4℃
1.3 恒温水浴： 46 ±1℃
1.4 天平
1.5 电炉
1.6 吸管
1.7 广口瓶或三角瓶：容量为 500ml
1.8 玻璃珠：直径 5mm
1.9 平皿：直径约 90mm
1.10 试管
1.11 放大镜
1.12 菌落计数器
1.13 酒精灯
1.14 均质器或乳钵
1.15 试管架
1.16 灭菌刀或剪子
1.17 灭菌镊子
2. 培养基和试剂
2.1 ：pfrzir 肠球菌选择性培养基（ PSE）：按 SN/T0475-95
中规定或按购买的商用培养基配方配制。
2.2 ：KF链球菌琼脂： 按 SN/T0475-95 中规定或按购买的商
用培养基配方配制。
2.3 ：叠氮化钠葡萄糖肉汤：按 SN/T0475-95 中规定或按购
买的商用培养基配方配制。
2.4 ：生理盐水
2.5 ：75%乙醇溶液
3. 检验程序
方法一：平板计数法： 粪链球菌的检验程序如下：
检样
做成几个适当倍数的稀释液
选择 2-3 个适宜稀释度各以 1ml 分别加入灭菌平皿中
每个皿内加入适量 KF 琼脂 (或 PSE 琼脂 )
36± 1℃ 48 ±2h( 或
24 ±2h)
菌落计数
报 告
3.1 操作步骤
3.1.1 检样稀释及培养
3.1.1.1 以无菌操作将检样 25g （或ml ）剪碎放于装有 225ml
灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内， （瓶内预置适
当数量的玻璃珠） 或灭菌乳钵内， 经充分振摇或研磨做成 1：
10 的均匀稀释液。
固 体 检 样 在 加 入 稀 释 液 后 ， 最 好 置 均 质 器 中 以
8000~10000r/min 的速度处理 1min ，做成 1：10 的均匀稀释
液。
3.1.1.2 用 1ml 灭菌吸管吸取 1：10 稀释液 1ml ，沿管壁徐
徐注入含有 9ml 灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内（注意
吸管尖端不要触及管内稀释液）振摇试管，混合均匀，做成
1：100 的稀释液。
3.1.1.3 另取 1ml 灭菌吸管，按上述操作顺序，做 10 倍递
增稀释液， 如此每递增稀释一次， 即换用一支 1ml 灭菌吸管。
3.1.1.4 根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，
选择 2-3 个适宜稀释度，分别在做 10 倍递增稀释的同时，
即以吸取该稀释度的吸管移 1ml 稀释液于灭菌平皿内。
3.1.1.5 稀释液移入平皿后，应及时将凉至 46 ℃的 pfrzir
肠球菌选择性培养基或
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