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金黄色葡萄球菌 1 简述 金黄色葡萄球菌（ Staphylococcus aureus ）为葡萄球菌属中的一种， 广泛分布于自然界，空气、土壤、水及物品上，人和动物皮肤及与外 界相通的腔道中，也经常有本菌存在。本菌可产生多种毒素及酶，这 些毒性物质引起局部及全身化脓性炎症， 严重时可发展成为败血症和 脓毒血症，是人类化脓性感染中重要的病原菌。本菌抵抗力较强，干 燥情况下能生存数月， 80℃30min 的条件下尚能存活， 5%石炭酸或 0.1%升汞溶液 10～ 15min 才会被杀死。 金黄色葡萄球菌检查按增菌、分离、纯培养、革兰染色、镜检和 血浆凝固酶试验等步骤进行。 本法使用于外用药品及一般滴眼剂、 眼 膏剂的检查。 2 仪器、设备及用具（见大肠埃希菌 2）。 3 试液、指示液 3.1 0.9%无菌氯化钠溶液或 pH7.2 无菌磷酸盐缓冲液 [ 附录 3.1 ，3.5] 。 3.2 pH7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液 [ 附录 3.2] 。 3.3 革兰染色液 [ 附录 2.4 ，2.10 ，2.16] 。 3.4 无菌枸橼酸纳氯化钠溶液 [ 附录 2.7] 。 3.5 血浆的制备 以无菌注射器吸取灭菌的 5%枸橼酸纳的 0.9%的氯化钠溶液 1ml，用 无菌操作采取家兔（或羊、人）血 9ml，轻轻混匀数分钟。待血液不 凝固时，徐徐放入灭菌离心管中，及时离心（ 500r/min 离心 5min0， 分离血浆，用灭菌吸管将血浆转移至灭菌试管中，置冰箱备用。临用 前必须用已知血浆凝固酶试验阳性的金黄色葡萄球菌 （如金黄色葡萄 球菌 [CMCC（B）26003] 测试，证明血浆合格后，方可用于试验。 3.6 1% 酚磺酞指示液 [ 附录 4.4] 。 4 培养基 4.1 营养肉汤培养基 [ 附录 5.1] 。 4.2 营养琼脂培养基 [ 附录 5.2] 。 4.3 亚碲酸盐肉汤培养基 [ 附录 5.15] 。 4.4 卵黄氯化钠琼脂培养基 [ 附录 5.16] 。 4.5 甘露醇氯化钠琼脂培养基 [ 附录 5.17] 。 5 对照用菌液 取金黄色葡萄球菌 [CMCC（B）26003] 营养琼脂斜面新鲜培养物少许， 接种至 5ml 营养肉汤培养基中， 36℃± 1℃培养 18～24h，用 0.9%无 6 菌氯化钠溶液，按 10 倍递增稀释至 1:10 ，加入含 10～ 100cfu 的对 6 照菌菌液（一般用量为 1:10 0.1ml ），同时用营养琼脂平板计数。 6 操作方法 6.1 供试品的检验量 9 见细菌、霉菌和酵母菌计数 5.3 ）。 6.2 供试液的制备（见细菌、霉菌和酵母菌计数 7）。 含抑菌成分供试品供试液的制备（见大肠埃希菌 6.2 ）。 6.3 增菌培养 取营养肉汤（或亚碲酸钠肉汤）培养基 2 份，每份 100ml，1 份加入 10ml 供试液，另一份加入与供