流感疫苗分类和应用.pptVIP

*  六、活毒疫苗的驯化 活毒疫苗的研发必须经过驯化或减毒(attenuation) 的过程。由于每一种病原的致病机制不同，因此驯化减毒的方法及难易程度亦不相同。 -传统的减毒过程通常是将病原不断的在动物体内或组织培养的细胞内继代繁殖，直到病原对其宿主的致病力减低至最小的程度。 -近年来的分子免疫学，研究解开病原的致病因子(virulence factor) ，因此也可以利用生物技术的方法，将病原致病因子的基因完全切除而达到减毒驯化的目的。 * 七、抗原剂量对免疫反应的影响 大剂量的抗原常使专一性免疫细胞类的T cells及某些B cells产生忍受性(tolerance)，而大剂量的多醣类抗原常使非T细胞依赖性的B细胞(non-T cell dependent B cells)产生忍受性。 -唯有适量的剂量才能达到最有效的免疫效果。 -过度的抗原有可能引发过度的免疫过敏反应。   八、免疫途径 抗原进入的途径可影响免疫反应的发生。 -死毒疫苗经由皮下注射或肌肉注射主要产生体液性免疫反应 -活毒疫苗则同时产生体液性免疫反应及细胞性免疫反应。大部分的致病原均经过身体的黏膜系(mucosal system)而进入体内致病。 -目前市售的疫苗大部分采皮下注射或肌肉注射进行免疫，此类疫苗虽可引发系统性免疫，却不能有效的引发黏膜性免疫反应(mucosal immunity)而迅速有效的清除致病原。 -除了可引发黏膜性免疫反应外也可引起全身性免疫反应，是目前认为较以肠胃外免疫如皮下注射或肌肉注射为佳的一种免疫方法。 -黏膜免疫以活毒疫苗用口服或喷洒到鼻腔内为较佳的选择型式，如沙宾(sabin)口服疫苗。 * 九、疫苗研发的趋势－抗原蛋白之制备 在疫苗制造的过程中，抗原蛋白的制备是不可缺乏的。以往抗原蛋白的制备方法是将病原大量培养后，（例如：流行性感冒病毒在鸡胚胎内培养，狂犬病病毒在鸭胚胎，日本脑炎病毒在小白鼠脑内繁殖，小儿痲痹病毒在培养之猴子肾脏细胞繁殖。）经过不活化处理，再将其抗原蛋白萃取纯化，这种方法既费时且昂贵，有时又有安全上的顾虑，尤其是当病原无法以人工方式大量培养时（如C型肝炎病毒），抗原蛋白的制备往往成为疫苗研发的瓶颈。如今藉由基因工程的方法将抗原蛋白的基因选殖出，再以基因表现的方式，利用微生物或其他的生物细胞大量生产抗原蛋白，如利用酵母菌生产B型肝炎表面抗原蛋白。 *  十、疫苗研发的趋势－疫苗驯化 疫苗的驯化及减毒过程是活毒疫苗研发的关键，传统以人工方法重复继代而驯化的疫苗是根据基因自然突变而筛选出来的，这样的疫苗除了毒性减弱以外，可能还有其他特性的改变（如免疫力降低），此外因自然突变而驯化的疫苗常是由于基因的些微改变，因此也会发生毒力恢复的现象，如沙宾小儿痲痹疫苗，造成使用上的危险。利用基因工程的方法，不但可找出致病基因，使我们对于许多疾病的致病原理有更深入的了解，且进一步可将与毒性有关的基因（例如疱疹病毒的胸腺激脢基因；thymidine kinase; 简称TK）缺损，如此得到的基因缺损减毒疫苗不但具有较稳定的遗传特性，同时也可充分保留病原的免疫力。 * 十一、疫苗研发的趋势－疫苗载体(VACCINE VECTOR)技术的建立 活毒疫苗研究的另一个趋势是疫苗载体(vaccine vector)与多价疫苗技术的发展。是将病原的基因，利用基因工程的方法殖入一个安全而且无致病能力的病毒或细菌载体，所得到的细菌载体感染人或动物体后能够大量生产病原基因所转译的蛋白，由于所产生的病原蛋白具有较正确的三级结构，因此往往能够引起很好的免疫效果。目前已有多种病毒及细菌被开发为疫苗载体，并已获得不错的成果（如：减毒活病毒，—Poxvirus:Vaccinia, Fowlpox virus, Canarypox virus; Adenovirus; Herpesvirus, Pseudorabis virus; Poliovirus.减毒细菌—Salmonella)。 -疫苗载体技术的更一步应用是将不同的抗原蛋白的基因殖入疫苗载体，同时产生两种或多种抗原蛋白而形成两价或多价型疫苗。由于抗原蛋白彼此之间的兼容性及重复使用同一种疫苗载体而造成免疫失效的可能性及移行抗体中和病毒的问题。 疫苗载体应用:流感疫苗 H7N9疫苗的生产方式 国光生技用鸡胚胎培养流感病毒，一颗鸡蛋可养10亿颗病毒，平均一批次26万颗鸡蛋，可产制大约20万剂疫苗。从鸡蛋到疫苗，约需6道步骤：病毒接种与培养、病毒采收、纯化病毒液、裂解病毒颗粒、去除病毒活性，及分装充填。 * 十二、疫苗研发的趋势－合成胜肽疫苗 (SYNTHETIC PEPTID