免疫组织化学.docVIP

免疫组织化学的基本知识 1免疫组织化学的概念：? 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂?(荧光素、酶、金属离子、同位素)?显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。? 2免疫组化实验所用的抗体有哪些？?  免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。? 3免疫组化实验所用的组织和细胞标本有哪些？?  实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，组织标本包括石蜡切片（病理大片和组织芯片）和冰冻切片，细胞标本包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。? 其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中首选的组织标本制作方法。? 4石蜡切片为什么要做抗原修复？有哪些方法？?  石蜡切片标本均用甲醛固定，使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行IHC染色时，需要