毒理学实验大纲.docVIP

PAGE 1 毒理学基础本科实验教学大纲 课程名称：毒理学 英文名称：TOXICOLOGY 课程性质：专业基础课，必修 课程代码：5046350 本大纲主笔人：黄毅娜 面向专业：预防医学专业和卫生检验专业 实验指导书名称：毒理学实验方法与技术 出版单位：人民卫生出版社 出版日期：2003年8月 主编：王心如 一、课程学时学分 课程总学时：90学时 课程总学分：5分 实验总学时：18学时（预防医学专业）15学时（卫生检验专业） 实验总学分：1分 二、实验的地位、作用和目的 毒理学研究外源化学物对于机体（特别是人体）的有害作用及其机制。毒理学作为一门实验科学，以动物实验为主要研究方法，评估外源化学物对健康的危害。毒理学基础理论与实践技能对于提高专业素质，培养创新性预防医学专业人才具有同等重要的地位，故毒理学实验课程目的是使学生在掌握毒理学的基本概念、基本理论的基础上，熟悉和掌握一些基础的毒理学动物实验基本技能，外源化学物评价试验的设计、实施、结果观察和评价等毒理学研究基本功。 三、实验方式及基本要求 采用观看视听教材，教师讲解和示教，以及学生自己动手操作等方式。熟悉和掌握一些基本的毒理学动物实验的设计、实施、结果观察和评价等。 四、实验报告 实验报告内容包括实验名称、目的要求、方法、结果、讨论。 五、考核与考试 考核学生实验报告，评优（A）、良（B）、差（C）三个等级。实习成绩占期末总成绩的20%。 六、基本设备与器材配置 小鼠笼子(10个/组)、天平（1台/组）、剪刀（1把/人）、镊子（1把/人）、止血镊（1把/人）、灌胃针（1个/人）、显微镜（1台/人）、多目共览显微镜（1台）、静式染毒柜（2个）、超净工作台（2台），培养箱（1台）等。 七、实验项目及内容提要 以下内容双线部分应重点掌握，单线部分应熟悉，其它部分应有所了解。 实习一 染毒方法和实验动物 目的要求 了解动物饲养和动物房环境的基本要求。了解大、小鼠习性。 了解染毒的各种方法，掌握大、小鼠灌胃方法，熟悉家兔皮肤染毒方法。 掌握大、小鼠的正常解剖方法，及脏器系数的计算。 实习内容 一、观看视听教材《动物实验基本操作技术》 二、简介动物饲养与动物房：动物的管理：动物、人员和动物房；环境条件的控制：温湿度、光照、噪音、垫料，群体密度和空间限制、笼具及饲料；实验动物设施的分类：开放系统、屏蔽系统和隔离系统。 三、大鼠、小鼠的生活习性；动物个体选择原则，性别鉴别方法，健康动物的判别标准。 四、常用染毒方法简介：经消化道染毒（练习小鼠灌胃）、经呼吸道染毒、经皮肤及黏膜染毒、注射途径染毒。 五、动物处死与解剖：颈椎脱臼法（练习，处死后解剖）、断头法、电击法、空气栓塞法、急性失血法等 六、示教内容： 1、皮肤染毒示教，对比同一化合物（乙二胺）对完整皮肤和破损皮肤的影响。 2、动物的捉拿和固定。 3、大鼠灌胃及解剖，脏器系数的计算及其意义。 实习二　HgCl2急性经口毒性试验 目的要求 掌握实验动物随机区组法。 掌握霍恩氏法测定LD50方法及特点。 用霍恩氏法测定HgCl2 的LD50并了解HgCl2的毒作用特点和毒性大小。 了解样品处理、配制，灌胃体积的计算。 实习内容 一、急性毒性试验的动物选择。 二、分组方法：随机区组法，本试验依据体重区段法来对动物进行区组。 四、霍恩氏法测定HgCl2 的LD50设计剂量系列。 五、受试物的配制，学习固定体积稀释法，剂量和灌胃体积比之间的关系。 六、灌胃染毒，观察和记录动物中毒症状，根据实验结果查霍恩氏表，得出LD50，判断HgCl2毒性分级。 实习三 急性吸入毒性试验 目的要求 掌握静式呼吸道染毒技术。 掌握用改进寇氏法计算LC50及其95%可信限。 实习内容 一、简介经呼吸道染毒的方式：动式染毒和静式染毒方法及其优缺点 二、用改进寇氏法计算LC50及其95%可信限。 1、改进寇氏法的特点。 2、改进寇氏法的基本要求（以某气雾杀虫剂吸入毒性试验为例）。 三、学生实习：静式呼吸道吸入染毒操作、观察。 实习四　微核试验 目的要求 掌握骨髓嗜多染红细胞试验的原理和目的。 熟悉骨髓嗜多染红细胞微核试验方法，多染红细胞与正染红细胞的区别及其比值的意义。 实习内容 一、微核试验的原理及目的。 二、微核的辨认，骨髓嗜多染红细胞与正染红细胞的区别。 三、常用的实验方法（30小时法） 动物的选择、分组、染毒方式和剂量的设计，以及结果的判断。 四、学生实习： 1、动物处死，取材：胸骨和股骨 2、制片、固定、配制缓冲液、染色。 3、在光学显微镜下区别和辨认骨髓嗜多染红细胞与正染红细胞，并计数50个骨髓嗜多染红