气相色谱法分离条件的选择.pptxVIP

a b c;K、n、α对色谱峰的影响 增加k,分离度增加，峰明显变宽； 增加 n,峰变窄，但改善分离度； 增加α，增加分离度，峰宽度不变。 ;二、实验条件的选择;（一）提高αα决定于试样中各组分本身的性质，以及固定相和流动相。;(二)提高k: k大，R大。 k与固定液的用量和分配系数有关，并受柱温的影响。 增加固定液的用量，可增大R ，但会延长分析时间，引起色谱峰展宽。 提高k的措施： 通过改变柱温和流动相组成，将k值控制为2～10。;(三)提高n;2.载气及其流速的选择;范氏方程： H=A+ B/u + Cu b. ;3.柱温的选择;降低柱温的影响： 1）增大分配系数，增加柱选择性； 2）降低气相扩散，减少固定液流失； 3）延长柱寿命，降低检测本底。 缺点： 1）增加分析时间； 2）液相传质阻抗增加，峰扩张，严重时引起拖尾。;3、柱温的选择; 表 根据试样沸点选择柱温等条件; 程序升温：指按预先设定的加热速度对色谱柱分期加热以使混合物中所有的组分均能在最佳温度下获得良好的分离。 程序升温可以是线性的，也可以是非线性的。;图a,恒定柱温Tc=45℃, 图b,恒定柱温，但Tc=120℃ 图c：为程序升温。;4、柱长和内径的选择;3、柱长和内径的选择;4、进样时间和进样量;进样量;五、其它条件;检测器温度：;三、样品预处理;一、毛细管气相色谱法的特点和分类 (一)毛细管气相色谱法的特点 1.分离效能高。 2.柱渗透性好（载气流动阻力小） 3.柱容量小，允许进样量小。一般采用分流进样技术和柱后尾吹。 4.易实现气相色谱-质谱联用。 5.总柱效高。 6.应用范围广。;;2.开管型毛细管柱;;按内径分：;详细表达式：; 空心毛细管柱，A=0， Cg: 气相传质项在毛细管柱速率理论方程中较为重要。 纵向扩散项随载气线速增加而下降。 为了降低气相传质项的斜率，增加Dg,常采用高扩散系数和低黏度的氢气作载气。 ;(二)毛细管色谱操作条件的选择;1.毛细管柱的直径;2.载气的选择;3.液膜厚度;三、毛细管气相色谱结构流程;(一)进样系统;1.分流进样;2.分流进样器和分流比;分流后，柱后流出的试样组分量少、流速慢。 解决方法：灵敏度高的氢焰检测器，采用尾吹技术。 ;3.线性分流; 第六节 定性与定量分析;常用定性方法;1.已知物对照法;复杂样品定性;2.利用相对保留值定性;;3.利用保留指数定性 ;4.官能团分类测定法 把色谱柱的流出物(欲鉴定的组分)，通 进官能团分类试剂中，观察试剂是否反 应(颜色变化或产生沉淀)，判断该组分 含什么官能团或属于哪类化合物。再参 考保留值，便可粗略定性。;5.两谱联用定性 气相色谱作为分离手段，质谱、红外光谱作为鉴定工具。 GC-MS，GC-FTIR ;二、定量分析方法;引入定量校正因子的原因;绝对校正因子(fi′)：单位峰面积所代表物质的质量 fi′ = mi / Ai fi′值与组分i质量绝对值成正比，所以称为绝对校正因子。 绝对校正因子的局限性： 1）精确求出fi′值比较困难。 2）对fi′值没有统一的标准而无法直接应用。;相对校正因子fi: 物质i和标准物质s的绝对校正因子之比。 fi = fi ′/ fs ′ 相对校正因子fi常用相对重量校正因子fg（fw）来表示。;相对校正因子的测定方法;2、定量方法： 归一化法 外标法 内标法 内标校正曲线法;2、定量方法——归一化法;2、定量方法——归一化法;外标法;外标一点法：;方法优点： 操作计算简便，不必用校正因子，不必加内标物，常用于日常分析。 方法缺点： 1）色谱条件（检测器的响应、柱温、流动相的流速（特别是对于气相色谱）、进样量、柱效等）对方法准确度影响极大 2）进样量要求准确;内标法;内标物应满足的条件;方法优点： 1.定量结果准确，不需准确进样； 2.只要内标物及被测组分出峰，与其他组分是否出峰无关； 3.适用于测定药物中微量有效成分或杂质的含量。 方法缺点： 样品配制麻烦，不易寻找内标物。