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不同鲜食葡萄品种花粉生活力测定及贮藏的效果研究 葡萄（Grapes），为葡萄科（Vitaceae Lindley）葡萄属（Vitis L.），多年生落叶藤本植物，是人类最早栽培和世界上分布最广的果树之一。近年来随着我国果树产业的发展，葡萄跃升成为发展速度最快的果树种类之一，我国以栽培鲜食葡萄为主，它不仅味美可口，而且营养成分丰富，成熟的浆果中含糖量高达10%～30%，以葡萄糖为主，可被人体直接吸收，是世界性的重要水果[1-2]。杂交育种是植物选育新品种的一种常规的育种方法[3]。高生活力的花粉是确保植物杂交育种成功的一个重要的前提条件，花粉生活力的高低直接影响其授粉、受精乃至坐果。因此，在进行杂交育种工作之前，都必须要了解花粉的生活力。由于不同鲜食葡萄品种的花期经常不一致，在进行杂交育种过程中，常涉及到其花粉生活力随贮藏条件变化的问题。有关葡萄花粉生活力贮藏条件的研究前人已有所报道，万怡震等[4-5]研究认为温度是影响花粉贮藏的主要原因，干燥条件下，贮藏温度越低，花粉的生活力下降越缓慢，贮藏期越长；杨传友等[6]研究认为低温对保持果树花粉生活力的效应极其明显。本试验以新葡一号、马奶子、京秀、木纳格、维多利亚以及黑贝蒂等6个鲜食葡萄品种为试材，比较它们之间新鲜花粉生活力的高低以及其花粉生活力随贮藏条件变化的情况，为在葡萄杂交育种中选择适宜的父本材料提供一定的理论依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　供试材料采自新疆维吾尔自治区鄯善葡萄瓜果研究中心葡萄种质资源圃，分别为新葡一号、维多利亚、木纳格、马奶子、京秀和黑贝蒂。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 花粉的采集与处理。2013年5月13日从正常生长的葡萄植株上随机选取处于初花期的葡萄花穗，放入塑料袋中用冰袋保鲜带回实验室。轻轻剥掉花瓣，取出花药，放在垫有硫酸纸的培养皿中，及时剔除其中的杂质和破裂的花药，然后将培养皿放置在室内阴凉干燥处阴干，待花粉完全散出后根据试验处理进行密封干燥保存，备用。 　　1.2.2 试验处理。 　　（1）按照琼脂8 g/L+蔗糖200 g/L+硼酸50 mg/L的配方配制培养基，pH值为6.0。将配制好的培养基倒入洁净的培养皿中，制作发芽床，待凝固后，用棉签蘸取贮藏前的各鲜食葡萄品种的花粉，轻轻振动，将花粉均匀地撒播在发芽床上（避免出现重叠），每个视野内50～100粒花粉，每个品种设3次重复，然后在培养皿盖中放入用水浸湿的滤纸，盖在发芽床上保湿，最后贴上标签写明品种名称和播种日期。在（25plusmn;1）℃的恒温箱中，黑暗条件下培养，在培养后8 h开始观察花粉的萌发率。 　　（2）将收集的6种鲜食葡萄品种的新鲜花粉均分为5等份，分别装入花粉瓶内密封保存，瓶外贴上标签，标明日期和品种名称，放入装有CaCl2的干燥器中，分别在25、5、0、 -20、-40 ℃等5种温度条件下贮藏。各贮藏条件下的花粉间隔5、10、15、20、25 d置于按上述配方配制的培养基中，按上述方法观察统计花粉的萌发率。花粉的耐贮藏力是以待测花粉生活力保持时间（即待测试样自收集到花粉生活力降为零的时间长度）来表示。 　　1.3 花粉萌发的观察和统计 　　花粉萌发标准：以花粉管长度超过花粉粒直径的1/2为萌发花粉。在1020倍光学显微镜下观察统计花粉的萌发数，并计算花粉的萌发率。每个培养基随机观察3个不重叠视野，记录萌发的花粉粒数和花粉总粒数。3个视野的平均值作为该培养皿内花粉的萌发率。花粉萌发率（%）=视野内萌发的花粉粒数/视野内的花粉总粒数100。 　　数据分析采用Excel 2003和DPS7.05数据分析软件进行数据处理及Duncanprime;s新复极差多重比较分析差异显著性。 　　2 结果与分析 　　2.1 不同鲜食葡萄品种花粉生活力 　　3 结论与讨论 　　3.1 不同鲜食葡萄品种花粉生活力比较 　　通过用离体培养法测定维多利亚、新葡一号、黑贝蒂、木纳格、马奶子、京秀等6个鲜食葡萄品种的新鲜花粉，发现新葡一号的花粉生活力较高，为50.41%，新葡一号、维多利亚、木纳格、马奶子4个品种间的花粉生活力差异不显著，但均与京秀差异极显著，且以京秀的花粉生活力最低，仅为24.13%。不同品种间花粉生活力的高低主要取决于品种自身的遗传特性[9]。花粉生活力的强弱必然会引起花粉育性的不同。因此，在杂交育种的工作中，对花粉生活力的研究十分重要。本试验的结果可为在鲜食葡萄杂交育种过程中选择适宜的父本材料提供一定的理论依据，这对于充分利用这些种质选育新的鲜食葡萄品种具有重要意义。 　　3.2 鲜食葡萄的花粉败育特性 　　各鲜食葡