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xx医科大学第x附属医院检验科SOP文件
白细胞手工计数
文件编号:JYK-LJ-
打印册数:
编 写 者:Abby You
审 核 者:
审核日期:
页 码: PAGE 1 共 NUMPAGES 2页
1. 原理
规范操作程序,提高检验结果的准确性和可比性。
2. 试剂
白细胞稀释液:冰乙酸2ml,蒸馏水98ml,10g/L亚甲蓝溶液3滴,混匀过滤后备用。
3. 标本处理:
用EDTA-K2真空采血管采集静脉血,采集完毕立即轻轻颠倒混匀。或者用微量吸管采集末梢血。
4. 方法
4.1取小试管1支,加白细胞稀释液0.38ml。
4.2用微量吸管准确吸取血样20μl,擦去管外多余血液,将吸管插入小试管中稀释液的底部,轻轻将血放出,并吸取上清液清洗吸管两次,混匀。
4.3待红细胞完全被破坏,再次混匀后,用微量吸管吸取混匀液10μl充池,静置2-3分钟,待白细胞下沉。
4.4用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数,对压线细胞按“数上不数下,数左不数右”的原则进行计数。
4.5计算:白细胞数/L =×10×20×106 =×109
公式中:N 4个大方格中白细胞的总数
÷4 为每个大方格(即0.1μl)内白细胞平均数
×10 1个大方格容积为0.1μl,换算为1.0μl
×20 血液稀释倍数
×106 由1μl换算成1L.
5. 注意事项
5.1小试管、计数板需保持清洁,以免杂质、微粒等被误认为细胞。。
5.2白细胞总数在参考范围内,大方格间的细胞数不得相差8个以上,两次重复计数误差不得超过10%。
5.3白细胞数量过高时,可以增大稀释倍数;白细胞数量过低时,可计数8个大方格的白细胞数或者加大取血量。
5.4有些贫血患者血液中有核红细胞增多,会当做白细胞计数,应予校正除去:
校正公式:白细胞校正数/L = X ×
公式中:
X:未校正前白细胞数
Y:在白细胞分类计数时,计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。
6. 参考值
成人:
男 (3.97~9.15)×109/L
女 (3.69~9.16)×109/L
儿童:
(8~10)×109/L
婴儿:
(11~12)×109/L
新生儿:
20×109/L
7. 临床意义:
7.1增加:
7.1.1生理性增加:新生儿、妊娠晚期、分娩期、月经期、饭后、剧烈运动后、冷水浴后及极度恐惧与疼痛等
7.1.2病理性增加:大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、急性出血、组织损伤、手术创伤后、白血病等。
7.2减少:病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再生障碍性贫血、极度严重感染、、X线照射、肿瘤化疗后和非白血性白血病等。
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