ENU与疾病动物模型电子教案.pptVIP

ENU诱变与疾病动物模型;人类遗传性疾病;人类疾病动物模型的用途;获得人类遗传病动物模型的方法;基因驱动法与表型驱动法;小鼠是第二个完成全基因组测序的哺乳动物。 人类疾病有关的遗传基因中的90%在小鼠身上有相似的效果。 小鼠容易获得，世代间隔短，饲养、管理、实验操作方便。 小鼠是研究人类疾病和基因功能的最为理想的模式动物，成为研究人类疾病和试验新的治疗手段的理想模型。;ENU诱变技术;ENU的结构 （N-ethyl-N-nitrosourea）;ENU诱变机制;screening and testing for dominant mutants;;指标分类;ENU诱变的历史和现状 ;国外进展;国内进展;ENU诱变建立疾病动物模型 ;小鼠疾病模型的开发与保种;;;ENU在建立人类疾病动物模型和开展基因功能研究中的主要优势;;我们的部分研究工作;;突变基因的定位技术路线;在 G1 代小鼠中，针对肉眼可见的神经行为、皮肤、毛发、五官、骨骼等可见表型筛查突变个体。筛查 G1 小鼠 1650只，获得突变小鼠 48 只。 在对G1突变小鼠的遗传试验及突变系小鼠保种过程中，繁殖小鼠1468只，确认能够稳定遗传的只有短尾、角膜浑浊和瞳孔异形突变小鼠等共 7 种，经卡方检验都属于单基因显性遗传。 ;;;;;;;突变基因的微卫星定位体系; 泳道1： 野生型D2品系小鼠对照； 泳道 2－17：F2角膜浑浊小鼠的检测结果，其中第9泳道发生重组，其余连锁。 ;角膜浑浊小鼠突变基因的连锁分析;角膜浑浊小鼠突变基因的染色体定位;D17Mit33与D17Mit143聚丙烯酰胺凝胶电泳结果 上图：第4泳道发生重组 下图：无 1 例发生交换，12、13、14分别为D2、F1、B6 ;短尾鼠的突变基因连锁分析;短尾小鼠突变基因的染色体定位;角膜浑浊突变小鼠的生物学特性初步研究;突变品系的建立及其模型性状研究的技术路线;角膜浑浊小鼠;角膜浑浊小鼠和野生型小鼠的繁殖学指标比较 ;;B6-Co与正常B6小鼠的脏器系数 ;角膜浑浊突变系与正常B6小鼠血常规的比较 ;角膜浑浊突变系与正常B6小鼠血液生化值的比较 ;;;角膜浑浊小鼠的角膜病理学特征（3）;角膜浑浊小鼠的模型价值;短尾突变小鼠的生物学特性初步研究;短尾小鼠后代尾巴的不同形态;;短尾小鼠的繁殖学指标 ; 不同尾形小鼠的统计结果 ;;;脏 器 系 数 比 较 表;血 常 规 比 较 表;血 液 生 化 值 比 较 表;短尾小鼠脏器系数、血常规、血液生化结果;;;所获短尾小鼠属于纵形肢体缺陷，与人类心手综合征（holt-oram syndrome，HOS）属于同一类型，其突变基因与人类TBX5基因高度同源。心手综合征在人类的发病率约为十万分之一。 短尾小鼠无疑是一个很好的骨骼畸形研究的动物模型。 ;短尾突变基因（T）的序列鉴定与分析;短尾突变基因序列鉴定与分析技术路线;实 验 方 法 ;8.5天 B6-St 小鼠胚胎总 RNA RT-PCR扩增产物，得到了 1494 bp 的特异性产物 ;T基因、突变T基因的cDNA序列与数据库序列的比对 ;巢式 PCR 验证结果 ;正常小鼠和突变小鼠的巢式PCR测序结果比对 ;;;T基因突变序列对应的基因组序列分析 ;正常B6和短尾小鼠基因组数据库DNA序列比对 ;结 果;数量性状基因突变;谢谢大家！敬请批评指正！