微生物的生长和环境条件讲解.ppt

一 些 细 菌 的 代 时 菌名 培养基 培养温度 代时 E. coli （大肠杆菌） 肉汤 37 ℃ 17min E. coli 牛奶 37 12.5 Enterobacter aerogenes （产气肠细菌） 肉汤或牛奶 37 16~18 E. aerogenes 组合 37 29~44 B. Cereus （蜡状芽孢杆菌） 肉汤 30 18 B. thermophilus （嗜热芽孢杆菌） 肉汤 55 18.3 Lactobacillus acidophilus （嗜酸乳杆菌） 牛奶 37 66~87 Streptococcus lactis （乳酸链球菌） 牛奶 37 26 S. lactis 乳糖肉汤 37 48 Azotobacter chroococcum （褐球固氮菌） 葡萄糖 25 344~46 Mycobacterium tuberculosis （结核分枝杆菌）组合 37 792~93 Nitrobacter agilis （活跃硝化杆菌） 组合 27 1200 应用意义： 对数期的微生物具有整个群体的生理特性一致、细 胞各成分平衡增长和生长速率恒定等优点，是： （ 1 ）用作代谢、生理等研究的良好材料； （ 2 ）是增殖噬菌体的最适宿主； （ 3 ）是发酵工业中用种子的最佳材料。 （ 4 ）进行染色、形态观察等的良好材料 。 （三）稳定期 （ stationary phase ， 恒定期、最高生长期 ） 1 ．特点： （ 1 ） R=0 ，即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数 相等，或正生长与负生长相等的动态平衡之中。培养 物中的细胞数目达到最高值。 （ 2 ）菌体产量达到了最高点； （ 3 ）菌体产量与营养物质的消耗间呈现出有规律的比 例关系 （ 4 ）细胞内开始积聚糖原、异染颗粒和脂肪等内含物； （ 5 ）芽孢杆菌一般在这时开始形成芽孢； （ 6 ）通过复杂的次生代谢途径合成抗生素等对人类有 用的各种次生代谢物（稳定期产物）。 2 ．稳定期到来的原因 （ 1 ）营养物尤其是生长限制因子耗尽； （ 2 ）营养物的比例失调； （ 3 ）酸、醇、毒素等有害代谢产物的累积； （ 4 ） pH 、氧化还原势等物理化学条件越来越不适宜； 等等 . （四）衰亡期（ decline phase ） 1 、特点： （ 1 ）细胞死亡数增加，死亡数大大超过新增殖的细胞数， 群体中的活菌数目急剧下降，出现“负生长” （ R ＜ 0 ） ； （ 2 ）细胞内颗粒更明显，细胞出现多形态、畸形或衰退形； （ 3 ）有些菌体因蛋白水解酶活力的增强而发生菌体自溶； （ 4 ）有的微生物合成或释放对人类有益的抗生素等次生代 谢 （ 5 ）芽孢杆菌在此期释放芽孢；等等。 2 、产生原因： 生长条件的进一步恶化，使细胞内的分解代 谢大大超过合成代谢，继而导致菌体的死亡。 由于微生物细胞极其微小，研究其个体生长存在着 技术上的困难（用电子显微镜和同步培养技术）。 同步生长 （ synchronous growth ）：一个细胞群体中 各个细胞都在同一时间进行分裂的状态，称为同步 生长。 同步细胞： 进行同步分裂的细胞称为 同步细胞。 同步细胞群体在任何一时刻都处在细胞周期的同一 相，彼此间形态、生化特征都很一致，因而是细胞 学、生理学和生物化学等研究的良好材料。 二、微生物的同步生长 化学诱导 物理诱导 诱导法 过滤法 区带密度梯度离心法 膜洗脱法 筛选法 同步培养法 获得同步生长的方法： 获得同步生长的方法主要有两类： 环境条件诱导法： 抗生素、变换温度、光线、培养基等。造 成与正常细胞周期不同的周期变化。 机械筛选法： 选择性过滤、梯度离心或膜洗脱法。 物理方法，随机选择，不影响细胞代谢。 硝酸纤维素膜 法 原理： 一些细菌细胞会紧紧粘附于具不同电荷的硝酸纤 维微孔滤膜上。 步骤： 菌悬液通过微孔滤膜，细胞吸附其上； 反置滤膜，以新鲜培养液通过滤膜，洗掉浮游细胞； 除去起始洗脱液后就可以得到刚刚分裂下来的新生细 胞，即为同步培养。 ★这种细胞在培养过程中，一般经 2 – 3 个分裂周期就会丧失其同步性。 三、微生物