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3. 琼脂平板扩散法 原理：将NSPS 底物与琼脂混融制成琼脂平板，将酶样点于琼脂板上的小孔中，培养一定时间，选用能与底物发生显色反应的显色剂染色，显示出染色背景区和无色透明的水解区，水解区直径与酶量的对数呈正相关，由水解区直径计算酶活力。 特点：灵敏度高，是还原糖法的100倍，测定所需样品量微，无需特殊设备。 演示课件 4. 可溶性的染色底物 原理：人工合成的含色原基团的底物在酶的作用下释放出有色物质，利用分光光度计比色测定有色物质含量，计算酶活力。 特点：重复性好，操作简便，灵敏度较高 ，但合成底物与天然底物有区别，对结果的准确性可能有影响 ，并且底物昂贵。 演示课件 D. 脂肪酶 原理：脂肪酶在一定条件下 ，能使甘油三酯水解成脂肪酸、甘油二酯和甘油，所释放的脂肪酸，可用标准碱溶液进行中和滴定，用pH或酚酞指示反应终点，根据消耗的碱量，计算其酶活。 反应式为： RCOOH + NaOH → RCOONa + H2O 演示课件 E. 植酸酶 1.国标法（钒—钼酸铵法） 原理：利用植酸酶水解植酸钠产生无机磷，再加入酸性钼钒试剂终止反应，同时与无机磷反应生成黄色钒钼磷络和物，在415nm比色测定含磷量，再以标准植酸酶为参照物，间接计算被测样品中植酸酶的含量。 演示课件 E.