. 课题3 血红蛋白的提取和分离 主要内容: 一、基础知识 二、实验操作 一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理 ㈠ 凝胶色谱法(分配色谱法) 1、凝胶: 一些微小多孔的球体(内含许多贯穿的通道,由多糖类构成如葡聚糖、琼脂糖) 2、概念: 根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法 3、原理: 4、具体过程 一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理 分子量 大 小 直径大小 大于凝胶颗粒空隙直径,被阻挡在颗粒的外面 小于凝胶颗粒空隙直径,可以进入颗粒内部 运动方式 垂直向下移动 垂直向下移动,无规则扩散进入颗粒内部 运动速度 较快 较慢 运动路径 较短 较长 洗脱次序 先从凝胶柱洗脱出来 后从凝胶柱洗脱出来 一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理 用凝胶色谱法分离蛋白质时,分子量大的蛋白质 A.路程较长,移动速度较慢 B.路程较长,移动速度较快 C.路程较短,移动速度较慢 D.路程较短,移动速度较快 D 相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的进行过程可表示为图中哪一个 B 1、概念:在一定的范围内,能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显变化的作用叫做缓冲作用,具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。 ㈡ 缓冲溶液: 2、作用: 能够抵制( )对溶液( )的影响,维持PH基本不变。 外界的
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