大肠埃希菌分离鉴定.docVIP

大肠埃希菌噬菌体得分离鉴定及其生物学特性研究* 孙荣华 , 李菁华 , 史红艳 , 孙延波 , 关显智 , 徐德启 ( 1、 吉林大学白求恩医学院病原生物学教研室, 吉林长春 130021; 2、 美国食品药品管理局肠道与性传播疾病实验室) = 摘要 目得 通过分离鉴定大肠埃希菌噬菌体, 研究其 生物学特 性。 方法 利 用噬菌斑 法从环境 污水中 分离与 鉴 定大肠埃希菌噬菌体, 采用负染法电镜观察噬菌 体得形态与大小; 提取噬菌 体得基因组 并进行酶 切电泳 分析, 测定噬 菌 体感染复数并观察其一步生长曲线。 结果 通过噬菌斑法分 离出 9 株大 肠埃希菌 噬菌体。电 镜显示, 噬菌 体头部 呈 立体对称, 有一长尾。琼脂糖凝胶电泳显示, 噬菌体基因组大小约 30 kb。 生长曲线表 明噬菌体感 染宿主菌 得潜伏期 为 23 m in, 爆发时间为 39 min, 裂解量为 78。 结论 9 株大 肠埃希菌噬菌体中有 6 株具有较广得 噬菌谱, 潜伏期短, 裂解 量明显, 为深入研究大肠埃希菌噬菌体得生物学 特性及其功能提供了依据。 = 关键词 大肠埃希菌; 噬菌体; 感染复数; 生物学特征 = 中图分类号 R378、 21 = 文献标识码 A = 文章编号 1673-5234( 2009) 02- 0088- 03 [ J our nal of Pathogen B iology 、 2009 Feb; 4( 2) : 88- 90, 104、 ] Identification and biological properties of Escheri chia col i phages isolated from raw sewage  ( 1 、 D e- p artment of M icr obiology , N or man Bethune School of M ed icine, J ilin Univer sity , Changchun 130021 , China; 2 、 L a- bor ator y of Enter ic and S ex ually T r ansmitted D iseases , Food and D r ug A d ministr ation , USA ) = Abstract Objective T o investig ate bio lo gica l pr operties of phag es, Escher ichia coli phag es w ere isolated fro m raw sew age、 Methods Bacteriophag es wer e identified using plaque methods, the electr on micro gr aphics of phages w as car- r ied out to o bserv e the mo rpholog y and size o f E、 coli phag e by neg ative- staining 、 T he ex traction of phag e g eno me and the electro phor esis of DN A wer e per formed、 M ultiplicity o f infect ion and g row th curve o f phages w ere det ermined、 Results Nine str ains o f E、 coli phag es wer e identified、 Electro n micr og raphics show ed that E 、 coli phag es ex hibit a cubic sym- metr y, and these phages have a lo ng ta il、 Electr ophoresis of DN A demo nstr ated that the size o f phage genomes w as a- r ound 30 kb、 T he gr ow th cur ve sho wed that the incubation perio d w as 23 min, the time o f burst phase w as 39 min, and the burst size w as 78、 Conclusion Six str ains o f phages have a abroad host range in E、 coli , a shor ter in