疫苗基础知识与疫苗研制（整理）.pptVIP

疫苗接种方法 皮上划痕法；（炭疽、鼠疫） 皮内接种法；（卡介苗） 皮下接种法； 肌肉注射法； 静脉注射法；（抗蛇毒血清、肉毒抗毒素） 口服法；（OPV糖丸） 无针注射法； 喷鼻法和气雾喷入法。 * 疫苗免疫程序的内容 免疫初始年龄； 必须接种的次数； 针次之间恰当的间隔时间； 是否需要加强免疫； 联合免疫的问题。 * 疫苗常见不良反应 一般反应：包括局部反应和全身反应。 局部反应：红晕、肿胀、疼痛。 全身反应：发热、头晕、乏力。 异常反应：包括非特异性反应、精神性反应和变态反应 非特异性：化脓。 精神性：晕厥、急性休克。 变态反应：皮疹、过敏性紫癜、血管神经性水肿。 * 中国微生物毒力分级 一类：传染性强，实验室感染机会多，感染后易发病，发病后症状重，危及生命，缺乏有效防治措施。如鼠疫杆菌、霍乱弧菌、天花病毒、埃波拉病毒。 二类：实验室感染机会多，症状重，危及生命，不易治疗。如炭疽芽孢菌、肉毒梭菌、狂犬病毒、出血热病毒、登革热病毒、甲型和乙型肝炎病毒。 * 中国微生物毒力分级 三类：仅具一般危害，能控制感染，可有效预防。如肺炎链球菌、百日咳杆菌、破伤风梭菌、乙型脑炎病毒、麻疹病毒、风疹病毒、狂犬病固定毒。 四类：低致病性或经人工减毒。如鼠疫、霍乱、麻疹病毒、流行性乙型脑炎、病毒性肝炎。 * 狂犬病毒街毒和固定毒 街毒：自然条件下可使人或动物致死。 固定毒：街毒在试验动物中传代，使其致病性减弱，仍保持免疫原性。 狂犬病毒街毒为二类病原微生物，固定毒为三类病原微生物。 生产用狂犬病毒毒株为狂犬病毒固定毒。 * 疫苗研制的一般程序 分离病原体并进行鉴定； 研究机体免疫反应，确定免疫原； 致病微生物体外培养研究； 根据需要，研制灭活疫苗或减毒活疫苗，也可以提取有效抗原成分，制成亚单位疫苗； 制订质量标准，包括检定方法研究。 * 人用狂犬病疫苗工艺流程 细胞复苏 细胞传代 接种病毒 多次收获病毒液 超滤浓缩 灭活 柱层析 离心 病毒收获液检定 病毒灭活检验 配制 分装 包装 纯化液检定 半成品检定 成品检定 * 中国狂犬病疫苗发展简史 1980年以前：羊脑疫苗 1980年～1995年：原代地鼠肾细胞疫苗（铝佐剂） 1995年～2000年：浓缩原代地鼠肾细胞疫苗（铝佐剂） 2000年～2005年：原代地鼠肾细胞纯化疫苗和Vero细胞纯化疫苗（铝佐剂） 2005年至今：原代地鼠肾细胞纯化疫苗和Vero细胞纯化疫苗（无佐剂） * 中国狂犬病疫苗发展 安全性 有效性 组织疫苗 细胞疫苗 纯化疫苗 1.3IU/剂 2.5IU/剂 4.0IU/剂 无防腐剂疫苗 冻干疫苗 * 现代生物技术在狂犬病疫苗生产中的应用 生物反应器细胞培养技术 膜过滤技术 膜超滤技术 层析技术 冷冻干燥技术 * 地鼠肾细胞疫苗和Vero细胞疫苗 地鼠肾细胞 Vero细胞 外源因子 难以控制 可控 批量 小 大 污染控制 困难 容易 高密度培养 不能 可以 批间差 大 小 质量控制 困难 容易 * 原代细胞和传代细胞 原代细胞培养指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能 。 传代细胞系指来源于肿瘤细胞或细胞株传代过程中变异的细胞系 。 * 细胞库 通过培养细胞用以生产连续多批制品的细胞系统，这些细胞经充分鉴定并证明无外源因子。细胞库包括原始细胞库、主细胞库和工作细胞库三级。 工作细胞库：由有限传代水平的主细胞库制备而来的均一性细胞悬液，分装适宜体积于多个容器中，冻存于－130℃或以下用于生产。 * 毒种种子批 包括原始种子批、主种子批和工作种子批的已验明其来源、历史和生物学特性并经临床研究证明其安全性和免疫原性的病毒株悬液，该悬液应为单一批，以确保其组成均一，并经充分鉴定。 工作种子批：按国务院药品监督管理部门批准的方法，从主种子批传代而得到的活病毒均一悬液，等量分装贮存用于生产疫苗。 * 三级库管理的必要性 避免混淆 保证种子细胞和毒种的稳定性 保证生产均一性，减小批间差 * Vero细胞培养方式 静止培养（克氏瓶） 转瓶培养 悬浮培养（载体） * 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 疫苗基础知识与疫苗研制 宁波荣安生物药业有限公司 乐威 * 生物制品概念 是以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为原料，应用传统技术或现代生物技术制成，用于人类疾病的预防、治疗和诊断。 * 人用生物制品 细菌类疫苗（包括类毒素） 病毒类疫苗 抗毒素及抗血清 血液制品 细胞因子 生长因子 酶 体内及体外诊断用品 其它生物活性制剂，如变态反应原、抗原抗体复合物、免疫调节剂、微生态制剂等。 * 疫苗基础知识