分子生物学 第四章-RNA转录 1-5节.pptVIP

* 朱玉贤，p92. 噬菌体的Ｎ基因产物，及其宿主蛋白质因子参与的过程。Ｎ蛋白与茎－环结构结合，并与 RNA 聚合酶结合，改变 RNA 聚合酶构象，而不能终止。 这些蛋白的结合改变 RNA 聚合酶的构象，使之不能识别终止信号，继续催化转录而不能终止。为何写成3’端在前，需要说明：合成的 RNA 是5’至3’端的方向,所以 DNA 模板必是3’在前面了，这是模板链！！ 破坏终止位点RNA的茎－环结构 一些控制氨基酸合成的操纵子中，转录和翻译偶联 介质中该氨基酸浓度较高时，氨酰基tRNA含量也高，核糖体能顺利通过串联密码子，mRNA形成正常的二级结构，能正常终止。 介质中该氨基酸浓度较低时，缺乏相应的氨酰基tRNA致使核糖体滞留在串联密码子上，mRNA不能形成特定的二级结构，转录继续进行 ★ 依赖于蛋白质因子的转录抗终止模式 噬菌体中由N基因编码的N蛋白具有抗终止的作用 依赖于宿主产生的NusA，NusB等蛋白质，这些蛋白质结合到终止子附近DNA位点 形成蛋白复合物，并通过NusA与RNA聚合酶相结合，改变酶的构象，使酶对终止信号不敏感，继续转录 * RNA 复制见P180， 南大杨荣武编。 二十世纪七十年代初科学家用X线射衍技术分析发现tRNA的三级结构为倒L形。tRNA三级结构的特点是氨基酸臂与TψC臂构成L的一横，-CCAOH3’末端就在这一横的端点上，是结合氨基酸的部位，而二氢尿嘧啶臂与反密码臂及反密码环共同构成L的一竖，反密码环在一竖的端点上，能与mRNA上对应的密码子识别，二氢尿嘧啶环与TψC环在L的拐角上。形成三级结构的很多氢键与tRNA中不变的核苷酸密切有关，这就使得各种tRNA三级结构都呈倒L形的。在tRNA中碱基堆积力是稳定tRNA构型的主要因素。 * * 2013-9-30, here * RNA 复制见P180， 南大杨荣武编。 * ρ：rho factor, 即rho 因子（符号为左侧往下）。 * RNA 复制见P180， 南大杨荣武编。 * 如何鉴定启动子。 植物启动子鉴定报告基因：Gus, β-glucuronidase; 来自细菌的uidA 基因，编码β- 葡萄糖苷酸酶，可溶性，为同源四聚体，68 kDa, 分解葡萄糖苷酸，发生显色反应，可对GUS进行原位检测；底物为 X-Gluc. GFP: 绿色荧光蛋白，来自水母，238个氨基酸，其发色团　 β-hydroxyl benzylidine inidazolinone 使其能吸收可见光而发射荧光，用荧光显微镜可监测到 GFP 产生的绿色荧光。 * 1975年，David Pribnow 经比较自己及其他人研究结果提出的保守结构序列。Pu, Purine, 嘌呤；Py, Pyrimidine, 嘧啶。 * 2013－10－11，第七次讲到此处。 * Pu，purine, 嘌呤； Py，pyrimidine, 嘧啶。 * RNA 复制见P180， 南大杨荣武编。 * 及其上游的调控序列是cis 或trans element? * ?：sigma factor; ?32, 就是分子量为32 kDa, 依次类推. * ?：sigma factor; ?32, 就是分子量为32 kDa, 依次类推. * ?70：分子量为70的sigma 因子。 2010-10-27　上课到此 * NT: non-template chain; T: template chain; Beita pincer: beita 钳子；Beita flap: Beita 盖子； RNA聚合酶Ⅰ合成RNA的活性最显著，负责转录编码rRNA的基因(称rRNA)，而细胞内绝大部分RNA是rRNA RNA聚合酶Ⅱ，负责核内不匀一RNA (hnRNA) 的合成，而hnRNA是mRNA的前体 RNA聚合酶Ⅲ负责合成tRNA和许多小的核内RNAs * * 该图共三页，第三页是释放RNA酶 * ITS: internal transcribed spacer; NTS, non-transcribed spacer; ETS, external transcribed spacer；三个RNA 来自一个转录单元，使三个RNA分子的摩尔分子数成比列。 * UCE: upstream control element; UBF: upstream binding factor. SL1: selectivity factor. * 鹅膏蕈(xun, 熏）碱；作用于真核细胞。 * RNA 复制见P180， 南大杨荣武编。 上一节课讲到这里 * * RNA 复制见P180， 南大杨荣武编。 * ρ：rho factor, 即rho 因子（符号为左侧往下）。 * RNA 复制见P18