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关于样品冻存您可能关心的问题…
• 我的样品应该放在什么温度下进行长期储存？
• 进行细胞冻存时，怎样才能保证细胞的活性？
• 我的样品存储在液氮液相中安全吗？需要什么样的保护措施呢？
• 您的冻存管是否发生过爆炸？该如何避免？
• 冻存过程中应注意的问题有哪些？怎么避免污染？
• 怎样选择合适的冻存产品，怎样提高样品储存容量？
• 有什么办法可能实现样品的有效追踪？
2
生物样本冷冻储存温度建议
3
各种生物样品的建议保存温度
我的样品应该放在什么温度下进行长期储存？
4
冷冻技术
• 冷冻原理：冷冻过程对细胞和组织影响的相关理论由上
世纪50-70年代Basil Luyet，James Lovelock ，Peter Mazur
等学者提出和发展，认为损伤主要来源于冰晶损伤和溶
液渗透压损伤。
• 冷冻方法
• 程序降温/分步降温（programmed
freezing/stepwise freezing ）
• 玻璃化冷冻（Vitrification ）：IVF、胚胎
• 急冻（Snap freezing ）：组织、蛋白
5
冻存操作的注意事项
• 与液氮接触的样品需在操作时注意：
• 急冻或长期液氮储存的样品会接触到液氮
• 不建议用微量离心管
• 对管口进行密封，避免液氮渗透
• 液氮渗入的风险：炸管、样品间交叉污染
• 转移过程中注意使用冰盒
• 生物安全柜中操作冻存管：
• 单手操作，避免污染，解决静电、管子滑落等问题
• 用力适中，避免扭力过度造成脱丝，影响密封效果
• 注意做好标记：
• 管盖和管壁均做标记
• 推荐使用冷冻标签纸和低温记号笔 • 微量离心管的管壁厚度和插
拔式管盖均不适用于液氮系统
，会出现大量炸管现象，造成
样品的损失
6
液氮液相储存的注意事项
7
液氮液相储存的注意事项
• 冻存管保护膜 CryoFlex™ —— 安全防护屏障
操作步骤
热风机
/item.htm?id=862
5282140prc=1
8
样品复苏时的注意事项
• 注意做好个人防护，避免炸伤
• 护目镜、面罩、手套、防护服
• 尽量使用镊子
• 水浴锅/烧杯上覆盖毛巾
• 样品复苏时：
• 对于未经保护的冻存管，切忌快速扔进水浴中
• 冻存管从液氮液相取出后必须在液氮气相中储存24h，这样可
以使得液氮从冻存管中慢慢的蒸发和逃逸，从而降低冻存管中
的压力。
• 冻存管从液氮液相取出后快速放置于-20度冰箱30min，再进
行水浴复苏。
• 冻存管从液氮取出后，用手轻轻拧松管盖，使液氮蒸发后再进
行水浴复
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