微生物检验实验室肠球菌属标准操作规程.doc

微生物检验实验室肠球菌属标准操作规程 1.概述 肠球菌属于1984年从链球菌属划出，单独成为一个菌属，包括粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、坚韧肠球菌、铅黄肠球菌、蒙氏肠球菌、海氏肠球菌、鹑鸡肠球菌和病臭肠球菌等18个种和1个变异株。临床上常见的菌株为粪肠球菌。 2.标本类型 血液、尿液、痰、穿刺液、脓液等标本。 3.鉴定 3.1 形态与染色 革兰阳性球菌，单个、成双或短链状排列。 3.2 培养特性 在血琼脂平板上形成较小、灰白色，有a溶血或β溶血环的菌落。在麦康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落。 3.3 生化反应 触酶试验阴性，分解甘露醇、山梨醇、胆汁七叶苷试验阳性、在含6.5%氯化钠的肉汤中生长，多数菌株PYR试验阳性，对杆菌肽耐药。 3.4 鉴别要点 3.4.1 本菌特征革兰阳性球菌，触酶试验阴性，在65g/L氯化钠中生长，胆汁、七叶苷试验阳性，45℃中生长。 3.4.2与屎肠球菌的鉴别：粪肠球菌不分解阿拉伯糖，而屎肠球菌能分解阿拉伯糖 3.4.3 与链球菌属和乳球菌属的鉴别：见表5-35 3.4.4 粪肠球菌与其他各主要菌种间的鉴别：见表5-36 操作步骤 3.5.1 触酶试验 阳性参见触酶试验标准操作规程 3.5.2 鉴定 从血平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4.药敏 参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20最新版本文件. 5.质量控制 参见《质量控制程序》 6.检验结果解释与分析 在β-内酰胺酶阴性球菌肠球菌中，氨苄西林药敏试验结果可预测阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等敏感性。青霉素药敏试验可预测氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等药敏结果。粪肠球菌中氨苄西林药敏结果可以预测亚胺培南的药敏结果。对于血培养和脑脊液中分离到的肠球菌，需做β-内酰胺酶检测，β-内酰胺酶阳性，则对青霉素、羧基青霉素和脲基青霉素均耐药。为耐万古霉素肠球菌做氯霉素、红霉素、四环素和利福平药敏试验，根据结果进行治疗。氨基糖苷类高水平耐药株HLRA可用庆大霉素120ug/片和链霉素300ug/片筛选，无抑菌环为耐药，抑菌环≥10mm为非HLAR，对于抑菌环在7～9mm之间的菌株需用稀释法确认。对于肠球菌属，头孢菌素类、氨基糖苷类（仅筛选高水平耐药性）、磺胺甲恶唑、甲氧苄啶和克林霉素在体外可能有活性（敏感），但在临床上耐药，所以不能报告肠球菌对这些药物敏感。 表5-35属常见菌种的生物学特性 菌种 甘露 山梨 山梨 精氨 阿拉 棉子 蔗 核 动 色 丙酮 醇 醇 糖 酸 伯糖 糖 糖 糖 力 素 酸盐 组1 鸟肠球菌 + + + - + - + + - - + 假鸟肠球菌 + + + - - + + + - - + 棉子糖肠球菌 + + + - + + + + - - + 病臭肠球菌 + + + - - - + + - - + 组2 粪肠球菌 + + - + - - + + - - + 屎肠球菌 + - - + + - + + - - - 卡氏黄色肠球菌 + - - + + + + + + + - 蒙氏肠球菌 + - - + + + + + - + - 铅黄肠球菌 + - - + + + + - + + - 鹑肠球菌 + - - + + + + + + - - 组4 坚韧肠球菌 - - - + - - - ND - - - 海氏肠球菌 - - - + - + + ND - - - 不称肠球菌