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实验常用试剂、缓冲液的配制方法
1、1M Tris-HCl □组份浓度 1 M Tris-HCl Na2HPO4 ,2 mM KH2PO4
(pH7.4 ,7.6,8.0 ) □配制量 1L □配制量 1L
□配置方法 1. 称量121.1gTris 置于1L 烧杯中。 □配置方法 1. 称量下列试剂,置于1L 烧杯中。
2. 加入约800mL 的去离子水,充分搅拌溶解。 NaCl 8 g
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH 值。 KCl 0.2g
pH 值 浓HCl Na2HPO4 1.42 g
7.4 约70mL KH2PO4 0.27g
7.6 约60mL 2. 向烧杯中加入约800 mL 的去离子水,充分搅拌溶解。
8.0 约42mL 3. 滴加HCl 将pH 值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定
4. 将溶解定容至1L。 容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。 4. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH 值,因为Tris 溶液的pH 注意:上述PBS Buffer 中无二价阳离子,如需要,可在配方中
值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH 值大约降低 补充1mM CaCl2 和0.5 mM MgCl2 。
0.03 个单位。 6、10 M 醋酸铵 □组份浓度 10 M 醋酸铵
2、1.5 M Tris-HCl □组份浓度 1.5 M Tris-HCl □配制量 100mL
(pH8.8 ) □配制量 1L □配置方法 1. 称量77.1g 醋酸铵置于100~200 mL 烧杯中,加
□配置方法 1.称取181.7gTris 置于1L 烧杯中。 入约30 mL 的去离子水搅拌溶解。
2. 加入约800mL 的去离子水,充分搅拌溶解。 2.加去离子水将溶液定容至100mL。
3. 用浓盐酸调pH 值至8.8。 3.使用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4. 将溶液定容至1L。 4.密封瓶口于室温保存。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。 注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH 值,因为Tris 溶液的 7、Tris- HCl 平衡苯酚 □配置方法
pH 值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH 值大约 1. 使
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