基因工程工具酶限制酶.pptVIP

第二章 基因克隆所需的工具酶 一、限制性内切酶 (restriction enzyme) 1 ．限制性核酸内切酶的发现 限制性核酸内切酶 ， 是一类能够识别双链 DNA 分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割 DNA 双链结构的核酸内切酶。它们主要是从原核 生物中分离纯化出来的。 根据 1994 年美国出版的《分子生物学百科全 书》的统计数字，仅Ⅱ型核酸内切限制酶一项迄 今就已从各种不同的微生物当中，分离出了 2300 种以上，可识别 230 种不同的 DNA 序列。 早在本世纪中期，以 Arber 等人对入噬菌体在 大肠杆菌不同菌株上的平板培养效应的研究为基 础，发现了原核生物体内存在着寄生控制的 限制 (restriction) 和 修饰 (modification) 系统。 在限制修饰系统中 限制作用 是指一定类 型的细菌可以通过限制性酶的作用，破坏 入侵的外源 DNA( 如噬菌体 DNA 等 ) ，使得 外源 DNA 对生物细胞的入侵受到限制； 而生物细胞 ( 如宿主 ) 自身的 DNA 分子合 成后，通过修饰酶的作用：在碱基中特定 的位置上发生了甲基化而得到了修饰，可 免遭自身限制性酶的破坏，这就是限制修 饰系统中