植物细胞有丝分裂的制片和观察讲解.pptVIP

植物细胞有丝分裂的制片与观察 一、实验目的 1. 掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术 2. 观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形 态特征 二、实验原理 1. 植物根尖、茎尖等分生区细胞能进行有丝 分裂 2. 在有丝分裂过程中，染色体发生规律性动 态变化 3. 染色体可被碱性染料着色，便于观察 4. 根据显微镜下观察到的染色体特点可识别 有丝分裂不同时期 三、实验仪器和药品 1. 仪器：显微镜、恒温箱、水浴锅、计时器、 烧杯、载玻片、盖玻片、剪刀、 镊子、滴管、刀片、玻璃皿 2. 材料：大蒜 3. 药品：诺卡氏固定液 1mol/L 的 HCl 作为解 离液、卡宝品红作为染色液 四、实验流程 1. 大蒜根尖培养及固定 ： 实验前 3-4d ， 将大蒜掰成蒜瓣摆在铺 有四层纱布的托盘里放入温度为 25 ℃ ， 一定湿度的培养箱中培养，每天换 水两次待根长到 1~2cm 将根剪下用吸 水纸吸干水分 , 将其放入诺卡氏固定液 （乙醇 : 冰醋酸 =3:1 ）固定 4~24 小时。 固定的作用 ：杀死细胞，固定细胞形态， 维持染色体的完整性，提 高染色效果 四、实验流程 1. 大蒜根尖培养及固定 2. 装片制作 （ 1 ）解离 目 的： 使组织中的细胞分离开 操作： 先用 95% 的酒精漂洗，在 HCL 中 60℃ 水浴 5min 左右 （ c ）解离时，细胞已死亡 （ a ）解离充分是实验成功的必备条件 注意： （ b ）解离过度，细胞结构被破坏 解离液： 1mol/L 的 HCl 四、实验流程 1. 大蒜根尖培养及固定 2. 装片制作 漂洗液： 清水（先置于清水中浸泡 2min 左右） 目的： 洗 去解离液，便于染色 次数 ： 2-3 次 注意： 若不漂洗 解离过度（ HCl 作用） 影响染色（ HCl 与碱性染 料反应） （ 1 ）解离 （ 2 ）漂洗 备注 : 将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中 四、实验流程 1. 大蒜根尖培养及固定 2. 装片制作 （ 1 ）解离 （ 2 ）漂洗 （ 3 ）取材 部位： 根尖 2-3mm 注意： 要 去除根尖乳白色根冠 （ 根尖分生区） 成熟区 伸长区 分生区 根冠 根 尖 的 结 构 四、实验流程 1. 大蒜根尖培养及固定 2. 装片制作 （ 1 ）解离 （ 3 ）取材 （ 2 ）漂洗 （ 4 ）染 色 操作： 用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者将根尖均 匀切成三份） , 用卡宝品红染色 ,6 ～ 8 分钟后， 盖上盖玻片 , 再盖上一个载玻片，用拇指轻 压载玻片 , 随即用一次性筷子进行敲片。 目的： 使细胞分散开，有利于观察 注意： 染 色时敲片的力度要适中 染色剂： 卡宝品红染液 时间： 6-8min （使染色体（质）着色） 染色时间过长—细胞全被染色， 无法观察 染色时间过短—染色体颜色过浅， 影响观察 四、实验流程 1. 大蒜根尖培养及固定 2. 装片制作 解离 → 漂洗 → 取材 → 染色 3. 观察 （ 1 ）低倍镜观察： 找到分生区细胞 特点 ： 细 胞呈矩形，排列紧密， 有分裂细胞 （ 2 ）高倍镜观察： 在低倍镜的基础上换用高倍镜 （ 3 ）仔细观察： 先找中期，再找其余各时期，注意染色 体特点 （ 4 ）移动观察： 慢慢移动装片，完整观察各个时期 四、实验流程 1. 大蒜根尖培养及固定 2. 装片制作 解离 → 漂洗 → 取材 → 染色 3. 观察 低倍镜观察 → 高倍镜观察 → 仔细观察 → 移动观察 注意： a . 观察时应先找到呈矩形的分生区细胞，在 一个视野里观察时，要注意边观察边移动装片， 观察有丝分裂各个时期 。 b. 显微镜下观察到的都是死细胞，不能看到细 胞分裂的动态变化。 c. 在显微镜下观察到间期细胞的数目最