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高效液相色谱结构 高效液相色谱法的特点和应用 流程及主要部件 process and main assembly of HPLC 2.主要部件P83 (2)梯度淋洗装置 (3) 进样装置 (4) 高效分离柱 * * High Performance Liquid Chromatograph 兽药残留检测 特点： “三高” “一快” “一广” 高柱效——n=104片/米，柱效高（远高于一般LC） 高灵敏度(紫外：10-9g；荧光：10-11g) 高选择性 分析速度快(＜1h) 应用范围广泛（可分析80%有机化合物） （是高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。） 1.流程 液相色谱流程图 PUMP Detector W Data station (Recorder) or Collection (1) 高压输液泵 主要部件之一，压力：150～350×105 Pa。 为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（10μm），液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。 应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀 往复式柱塞泵 死体积小，很 适用于梯度洗 提等特性。 外梯度: （低压梯度） 将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。 内梯度：（高压梯度） 一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。 流路中为高压力工作状态， 通常使用耐高压的六通阀进样装置， 其结构如图所示： 装入样品 出口 进样 采样环 泵入溶剂 进色谱柱 柱体为直型不锈钢管，内径1～6 mm，柱长5～40 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。 理想的HPLC检测器应具有如下特性：??? 第一，具有高灵敏度和可预测的响应； 第二，对样品所有组分都有响应，或具有可预测的特异性，适 用范围广； 第三，温度和洗脱液流速的变化对响应没有影响； 第四，响应与洗脱液组成无关，因此可作梯度洗脱； 第五，死体积小，不造成柱外谱带扩展； 第六，使用方便、可靠、耐用，易清洗和检修； 第七，响应值随样品组分量的增加而线性增加，线性范围宽； 第八，不破坏样品组分； 第九，能对被检测的峰提供定性和定量信息； 第十，响应时间快。 (5) 液相色谱检测器 * *