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实验:培养液中酵母菌种群数量的变化 实验原理: 探究问题: 提出假设: 酵母菌可以用液体培养基来培养, 培养液成分、空间、pH、温度等因素 会影响酵母菌种群的增长 培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的? 在资源和空间有限的环境中,酵母菌的种群呈“S”型增长 需要准备的材料及用具 探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血细胞计数板、滴管、显微镜等,都是由老师提供 目的要求 1、学习使用血细胞计数板进行微生物计数 2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3、体会影响种群数量变化的因素 血细胞计数板 血细胞计数板的结构 血细胞计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器,由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。 大方格 中方格 小方格 方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。 大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,即1mm×1mm×0.1mm,其容积为0.1mm3; 大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,即2mm×2mm×0.1mm,其容积为0.4mm3 计数室通常也有两种规格 16×25型: 即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格 25×16型: 即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。 不管计数室是哪一种构造,其每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。 2、计数 16×25型: 一般取四角的四个中方格(100个小方格)计数 25×16型: 一般计数四个角和中央的五个中方格(80个小方格)的细胞数。 盖玻片下的培养液厚度为0.1mm,请推算出将一个小方格范围内的酵母菌数,换算成10ml培养液中酵母菌总数的公式。(大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,即1mm×1mm×0.1mm,其容积为0.1mm3;) ( 1ml =1cm3=1000mm3) 每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式 (1)16格×25格的血细胞计数板计算公式 酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数× 4× 106(×稀释倍数) (2)25格x16格的血细胞计数板计算公式 酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数× 4× 106(×稀释倍数) 大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,其容积为0.4mm3。则:每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式(2mm× 2mm ) : (1)16格×25格的血细胞计数板计算公式 酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数×106(×稀释倍数) (2)25格x16格的血细胞计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数×106(×稀释倍数) 1.通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若计数室为1mm×1mm×0.1mm方格,由400个小方格组成,若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。 5×400×10000×10=2×108 2、检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1mm3。 现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻多少个。 =n/ 80×400×10000×10=5n×105 怎样进行酵母菌的计数? 提示:对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的,可以采用抽样检测的方法:先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,稍待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数 量,再以此为根据,估算试管中的酵母菌总数。 注意事项 从试管中吸出培养液进行计数之前,建议将试管震荡几次,目的是什么? 本实验需要设置对照吗? 本实验需要做重复实验吗? 目的:使培养液中酵母菌分布均匀,以保证 估算准确,减少误差 不需要,因为本实验在时间上形成自身前后对照 需要,提高实验数据的准确性 注意事
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