生化技术沉淀.pptxVIP

第二章生物大分子的纯化方法概 述 蛋白质、酶和核酸等生物大分子的结构与功能的研究是探求生命奥秘的中心课题达到足够纯度的生物大分子的制备工作作为前题 。常用的分离纯化方法和技术有：沉淀法（包括：盐析、有机溶剂沉淀、选择性沉淀等）离心吸附层析、凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析快速制备型液相色谱以及等电聚焦制备电泳等。沉淀法沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。基本原理：溶解度的不同不同溶解度的产生的原因：亲和力的差异溶解度的大小与下列因素有关：溶质和溶剂的化学性质及结构加入某些沉淀剂溶液的pH值、离子强度和极性在生物大分子制备中最常用的几种沉淀方法：中性盐沉淀法（盐析法）有机溶剂沉淀法蛋白质沉淀法有机聚合物沉淀选择性沉淀法（热变性沉淀和酸碱变性沉淀）结晶沉淀法 中性盐沉淀（盐析法）在溶液中加入中性盐使生物大分子沉淀析出的过程称为“盐析”。在蛋白质领域应用最广，其突出的优点： ①成本低，不需要特别昂贵的设备。 ②操作简单、安全。 ③对许多生物活性物质具有稳定作用。 中性盐沉淀蛋白质的基本原理 盐分级沉淀：多次盐析的应用中性盐的选择： 常用的中性盐中最重要的是(NH4)2SO4，因为它与其他常用盐类相比有十分突出的优点：1) 溶解度大： 几种盐在不同温度下的溶解度（克/100毫升水） 0℃ 20℃ 80℃